Бактериоскопические исследования – SYNLAB Eesti
Интерпретация результатов бактериоскопии
Прямая микроскопия нативного материала является частью клинического исследования пациента, цель которого – определить морфологию микроорганизмов и наличие воспалительной реакции со стороны организма.
Показания: Прямая микроскопия нативного материала дает информацию о общем состоянии генитального тракта, позволяет оценить наличие и интенсивность воспалительной реакции, зрительно оценить клетки слизистой оболочки и имеющиеся микробы. При известных инфекциях прямая микроскопия имеет диагностическую ценность (гонорея у мужчин, трихомоноз).
Исследуемый материал: Соскоб из цервикального канала, влагалища, уретры (на предметное стекло)
Метод анализа: Микроскопия
Соответственно международным стандартам у каждого пациента необходимо смотреть два препарата, окрашивая их по методу Грама и Лейшману-Гимза.
Методика окраски по Лейшману-Гимза является основной методикой для определения инфекции Trichomonas и внутриклеточных микроорганизмов, также эта методика очень информативна для исследования клеточных элементов; позволяет оценить отличия эпителия генитального тракта (вагинальный, эндоцервикальный, слизистая оболочка уретры).
На основе методики окраски по Граму микробы подразделяются на Грам-положительные и Грам-отрицательные. В диагностике бактериального вагиноза это основной метод окраски, поскольку он позволяет определить критерии Nugent.
Интерпретация результата:
ЭПИТЕЛИАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ
- Суперфициальные. Максимального своего числа (96%) достигают во время овуляции. К 27-28 дню цикла их число падает до 4%.
- Интермедиарные. Составляют большую часть клеток в первые (74-76%) и последние (96%) дни цикла. Минимальное их количество во время овуляции (3,5%).
- Парабазальные.
У женщин репродуктивного возраста имеются в препарате только во время менструации. Также их часто можно обнаружить при низком уровне эстрогенов. - Базальные. В препарате здоровых женщин не определяются. Обнаружение базальных клеток указывает на наличие воспалительного процесса слизистой или травматического повреждения. При воспалении также имеется множество лейкоцитов. NB! Парабазальные и базальные клетки также являются отличительным признаком атрофического вагинита.
- Спонтанно отслоившиеся клетки эндометрия. У женщин репродуктивного возраста их можно обнаружить первые 12 дней после менструации. Обнаружение клеток эндометрия во второй фазе цикла свидетельствует о наличии эндометрита, полипа эндометрия или связано с использованием внутриматочного контрацептивного средства.
У женщин репродуктивного возраста имеются в препарате только во время менструации. Также их часто можно обнаружить при низком уровне эстрогенов.
ЛЕЙКОЦИТЫ
- Нейтрофилы. Клетки острой фазы. В препарате можно обнаружить следующие патологические формы:
- гиперсегментированные: число ядерных сегментов 6 и более, величина клеток может превышать 15 μm. Возникают при мегалобластной и пернициозной анемии, хронической инфекции и применении химиотерапии.
- гипосегментированные: число ядерных сегментов 3 и меньше. Возникают при некоторых инфекциях и на фоне применения химиотерапии (особенно препаратов группы сульфонамидов).
- гиперсегментированные: число ядерных сегментов 6 и более, величина клеток может превышать 15 μm.
- Моноциты или мононуклеарные фагоциты. Отвечают за хроническую фазу воспаления.
- Эритроциты. У некоторых женщин определяются в период овуляции и перед мен- струацией.
Возникают при мегалобластной и пернициозной анемии, хронической инфекции и применении химиотерапии.
СООТНОШЕНИЕ ПОЛИМОРФОНУКЛЕАРНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ ПМН И ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК
- У здоровых женщин это соотношение менее, чем 1:1.
- Пропорции клеток 2:1 и 3:1 и более, являются маркером острого воспаления.
МИКРООРГАНИЗМЫ
Нормальная микробиота у мужчин
| Уретра | Семенная жидкость |
Доминирует грамм-положительная микрофлора. Наиболее частые изоляты:
Реже и в небольшом количестве встречаются S.aureus, S. pyogenes, стрептококки B группы, Enerobacter spp. и микрококки | Нестерильная число микробов варьирует инди- видуально от 10² до 107 PMÜ/mL. |
Самое богатое микроорганизмами место это дистальная часть уретры и самая бедная – спонгиозная часть.
Нормальная микробиота у женщин
| Наружные гениталии | Уретра | Влагалище |
| • S. epidermidis • Viridans стрептококки • Peptostreptococcus spp. • Corynebacteria • Mycobacteria • Enterobacteriaceae | • S. aureus и CONS• Enterococcus • Neisseria (авирулент- ные) • Corynebacteria • Mycobacteria • Enterobacteriaceae • Gardnerella vaginalis • Mycoplasma • Грибки | Аэробы: Микроаэрофилы и анаэробы: |
ГРАМ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ ПАЛОЧКИ
- Genus Lactobacillus. Их количество в препарате колеблется циклично, больше всего их можно обнаружить на фоне овуляции (10-14 день). Иногда множество лактобацилл имеется на 19-23 день цикла, что может вызвать цитолиз промежуточных клеток.
- Genus Corynebacterium. Большинство представителей этого вида факультативные или же непатогенные.
Большинство представителей этого вида факультативные или же непатогенные.
ГРАМ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ КОККИ
- Genus Staphylococcus
- S. aureus в сообществе с E. coli, и стрептококками группы В и Trichomonas vaginalis может вызывать аэробный вагинит. На наличие аэробного вагинита указывает большое количество парабазальных клеток и лейкоцитов (также их гранулярный аспект).
- S. epidermidis является важнейшим фактором уретрита и простатита у молодых (42%).
- Увеличилась частота возникновения бактериурии с S. saprophyticus у молодых женщин. Также при инфекции амниона у беременных женщин может быть изо- лирован из материала цервикального канала.
- Genus Streptococcus
- S. agalactiae (стрептококк В группы) колонизируется на слизистой оболочке половых путей 5-40% женщин. Вульвовагинит же может возникнуть только тогда, когда их число достигнет не менее 108 PMÜ/g, а также будет определяться одновре- менно E. coli и S. aureus. Часто может быть одновременно с Candida albicans (55%).
- S. agalactiae (стрептококк В группы) колонизируется на слизистой оболочке половых путей 5-40% женщин. Вульвовагинит же может возникнуть только тогда, когда их число достигнет не менее 108 PMÜ/g, а также будет определяться одновре- менно E.
coli и S. aureus. Часто может быть одновременно с Candida albicans (55%).
ACTINOMYCES
Имеется в полости рта здоровых людей и на слизистой оболочке половых путей женщин. В качестве колонизирующего микроорганизма может быть у женщин, использующих внутриматочные противозачаточные средства (7%). Достаточно часто Actinomyces сопровождается Entamoeba gingivalis. Может быть причиной симптоматической инфекции.
ГРАМ НЕГАТИВНЫЕ ПАЛОЧКИ
- Представители Enterobacteriaceae
- Наиболее частые возбудители инфекций уротракта это Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp., Pseudomonas spp.
- Диагностическую ценность имеет обнаружение E. coli в больших количествах, особенно вместе с другими энтеробактериями и на фоне PMN либо же с BV- микробами.
ГРАМ НЕГАТИВНЫЕ КОККИ
- N. gonorrhoeae (гонококки)
- N. meningitidis (менингококки)
- Genus Acinetobacter. В большинстве своем кокобациллы или диплококки. Изоли- руются из слюны, мокроты, мочи и влагалищного секрета.
- Genus Moraxella. Морфологически неотличимы от нейсерий. В некоторых случаях можно обнаружить M. catarrhalis среди полиморфных лейкоцитов.
meningitidis (менингококки)
GARDNERELLA VAGINALIS
Имеется в микрофлоре у 45-58% здоровых женщин репродуктивного возраста и у 27% женщин в период менопаузы.
LEPTOTRICHIA
Относительно низкой патогенности. Возникает обычно на фоне трихомоноза, бактериального вагиноза или длительного курса противовоспалительного лечения.
ДИАГНОЗ БАКТЕРИАЛЬНОГО ВАГИНОЗА ПО КРИТЕРИЯМ NUGENT
- Различное число морфотипов в препарате, окрашенном по Граму
- Норма 0-3
- Пограничное значение 4-6
- Бактериальный вагиноз >7
ДИАГНОЗ БАКТЕРИАЛЬНОГО ВАГИНОЗА ПО КРИТЕРИЯМ AMSEL
- Гомогенные молокообразные выделения из влагалища
- Положительный аминовый тест
- Ph >4,5
- Микроскопическая находка: клетки „clue“ (~20%) Gardnerella, Mobiluncus и др.
ГРИБЫ
- Бластоспоры, лейкоцитов мало или отсутствуют – колонизация
- Бластоспоры, лейкоцитов много – Candida non-albicans, необразующая псевдомицелий
- Бластоспоры, лейкоцитов много – инфекция Candida albicans
Что показывает мазок на флору?
Методика мазка на флору очень проста. При осмотре в зеркалах берётся отделяемое со слизистой оболочки уретры, шейки матки и влагалища. Наносится на предметной стекло, высушивается, окрашивается, после чего врач-лаборант исследует препарат под микроскопом.
⠀
Условия для качественного мазка:
– вне менструации
– накануне исключить вагинальные свечи, таблетки, спринцевания, ванны
– за 1-2 дня не иметь половые контакты
– за 1-2 часа не мочиться
⠀
Нормальный мазок – это:
– умеренное количество слизи и клеток эпителия
– количество лейкоцитов до 10 в поле зрения в уретре и влагалище, до 30 – в цервикальном канале
– преобладание грам+ палочковой флоры
– отсутствие гонококков, трихомонад, ключевых клеток, кандида.
⠀
О чем могут свидетельствовать отклонения от нормы?
⠀
✳ Повышение лейкоцитов (а это наши защитники при любой инфекции) – признак воспаления. Количество слизи и клеток плоского эпителия при воспалении также повышено. Ставим диагноз вагинит, цервицит и назначаем лечение.
⠀
✳Выявлены ключевые клетки, гарднереллы, лептотриксы, снижено количество лактобацилл, преобладает кокковая флора – бак. вагиноз (дисбактериоз влагалища), промежуточное состояние между нормой и патологией, снижение местного иммунитета, условие для воспаления. Основная цель терапии – нормализация микрофлоры и рН влагалища.
⠀
✳При кандидозе (молочнице) в мазке выявляются нити мицелия и(или) споры гриба. Если есть жалобы, признаки воспаления – лечим.
⠀
✳С гонореей, трихомониазом, я думаю, все понятно. Лечение без вариантов.
⠀
Надо чётко понимать, что мазок на флору – лишь базовое исследование.
⠀
Хламидии, микоплазмы, уреоплазмы – слишком мелкие микробы и в мазке на флору не определяются.
⠀
Мазок на флору не показывает количество и соотношение микробов, не даёт чувствительность к антибиотикам. Для этого используются другие методы.
dr.kuchumova_gyn
Есть вопросы? Напишите доктору.
зачем берут общий мазок на флору, что показывает
Мазок на флору является важным диагностическим исследованием, широко применяющимся с целью оценки женского здоровья.Для чего нужен мазок на флору
Гинекологический мазок– это то, что в первую очередь должен порекомендовать врач на первичном приеме вне зависимости от симптомов. Это исследование наряду с кольпоскопией входит в золотой стандарт профилактического ежегодного осмотра у женщин. Микроскопия мазка позволяет оценить состояние влагалища и наличие/отсутствие воспалительного процесса в органах репродуктивной системы.
Лаборант увидит на предметном стекле количество лейкоцитов, эпителиальных клеток и соотношение бактерий. Если в результатах кокки преобладают над полезными бациллами или визуализируются грибы, это означает дисбактериоз, воспаление или кандидоз. При повышенном количестве лейкоцитов в мазке гинеколог может назначить дополнительные анализы на ИППП.Подготовка к сдаче мазка
Оптимальное время для мазка на флору – середина цикла. Во время менструации забора биоматериала не осуществляется. Это связано с тем, что присутствие кровяных телец может существенно исказить его результаты. Материал для анализа может быть взят из уретры, со стенок влагалища или из цервикального канала. Подготовительные меры ко всем трем исследованиям при этом принципиальных отличий не имеют. На консультации акушер-гинеколог уточнит, принимались ли антибиотики на протяжении последних двух недель перед приемом. В случае положительного ответа, мазок будет перенесен на другое время. Наиболее достоверные результаты можно получить, только соблюдая ряд условий.
Накануне мазка следует:- За два-три дня исключить применение любых вагинальных свечей
- За два-три дня граничить половые контакты
- За сутки до анализа не принимать ванную (только душ)
- За два дня исключить спринцевания влагалища
- В день посещения врача произвести стандартный туалет половых органов с водой
- Перенести другие гинекологические исследования на другое время (например, кольпоскопию, ультразвуковое сканирование интравагинальным датчиком)
Как проходит процедура
Взятие биоматериала для исследования мазка занимает по времени несколько минут и проходит в гинекологическом кресле. Врач с помощью зеркала и стерильного одноразового инструмента берет образцы, а затем помещает их на предметное стекло с символами U, C или V. Буквы обозначают локализацию биоматериала – уретру, шейку матки или влагалище. В качестве инструментов для мазка могут быть использованы ватный тампон, цервикальная щетка или шпатель. Манипуляция полностью безболезненная и не доставляет дискомфорта.
Нормы мазка на флору
В норме среди микроорганизмов, составляющих биоценоз влагалища присутствуют лактобактерии, грамм-положительные палочки, бифидобактерии, условно-патогенные микроорганизмы и грибы. У здоровой женщины около 90 % микрофлоры занимают полезные бактерии. Эти микроорганизмы препятствуют размножению условных патогенов и грибов, выделяя особые вещества, имеющие антибактериальный эффект. При снижении количества полезных бактерий начинается рост условных патогенов. Такое состояние называется дисбактериозом флоры и требует терапии. Лечение заключается в укреплении иммунитета пробиотиками. В некоторых случаях врач может выписать антибиотики.Среди прочих микроорганизмов, мазок может содержать стафилококки, стрептококки и другие бактероиды. Их количество не должно превышать 5 % от общей бактериальной массы.
Норма лейкоцитов в мазке из влагалища – от 0 до 15 единиц. В уретре и шейке матки – до 10 единиц. Лейкоцитозом считается состояние, при котором их количество в анализе превышает 15 и более единиц.
Как правило, при беременности и в период восстановления после родов этот показатель незначительно возрастает. Подобный лейкоцитоз не имеет каких-либо сопутствующих симптомов и не вызывает у женщины дискомфорта.
В результатах мазка в небольшом количестве присутствуют клетки плоского эпителия. Их уровень у женщин коррелирует в зависимости от дня менструального цикла. Если подобных клеток в анализе много, и они визуализируются пластами, это может быть результатом воспалительного процесса во влагалище.
Еще один показатель исследования — это слизь, секретируемая железами цервикального канала. Если такой слизи обнаруживается в избытке, это может быть признаком острого или хронического цервицита.
Мазок на флору при беременности
Для того чтобы беременность протекала благоприятно, организм женщины должен быть максимально к ней подготовлен. Поэтому, как только врач установит на гинекологическом УЗИ тот факт, что плодное яйцо находится в матке, рекомендуется сразу же сдать мазок на ИППП и биоценоз.
Невылеченные и хронические инфекции могут в дальнейшем спровоцировать самопроизвольное прерывание беременности и стать причиной невынашивания. Такие венерические заболевания как хламидиоз способны стать причиной заражения ребенка во время его прохождения через родовые пути.В результатах анализа беременной часто повышены лейкоциты. Их число в этот период может составлять от 15 до 30 единиц во влагалище и до 5 в мазке из уретры. Это связано с естественной реакцией организма на физиологический стресс, поскольку в период вынашивания ребенка иммунная система женщины активизируется. Такое состояние считается нормой и регулируется эстрогенами.
Сколько ждать результатов исследования
В целом, сроки исполнения мазка на флору у женщин составляют от одного до четырех дней. При этом день визита к акушеру-гинекологу в расчет не берется. Длительность получения результатов анализа обусловлена спецификой метода лабораторного исследования. Оценка состояния влагалища, шейки матки и уретры производится в течении суток.
Если результаты анализа неудовлетворительные, врач может назначить ПЦР тест*.Преимущества метода ПЦР:
- Достоверность благодаря высокой чувствительности
- Быстрота выполнения
- Специфичность относительно ИППП в любой форме
- Возможность диагностики большинства инфекций урогенитального тракта
- Точность установления типа возбудителя инфекции
Что врачи не видят при микроскопии мазка?
Мазок на флору не дает данных о наличии или отсутствии беременности, а также о таких инфекциях как вирус папилломы человека, ВИЧ и герпес любых типов. Анализ также не может выявить у женщин наличие атипичных клеток в эпителии шейки матки или влагалища.Зачем нужна проверка на восприимчивость к антибиотикам
Если в мазке будет обнаружено большое количество условно-патогенных бактерий, врач порекомендует пациентке тест с определением чувствительности к антибактериальным препаратам.Болезнетворные микроорганизмы не одинаково реагируют на разные антибиотики.
На сегодняшний день существует целый спектр лекарственных препаратов, действие которых направлено на разных возбудителей. Если один патоген может активно погибать от одного вида препаратов, на других те же самые антибиотики могут действовать слабо или не действовать совсем. От того, насколько точно будет проведен такой тест зависит то, насколько быстро будет устранен инфекционный агент.
По итогам исследования предоставляется список медицинских препаратов, наиболее подходящих для устранения проблемы.
(21 оценок, среднее 4.43 из 5)
Читайте также
на что смотреть, и как понять
Большинству женщин мазок «на флору» знаком, как самый «простой» гинекологический анализ. Однако исследование куда «полезнее», чем может казаться. И всего несколько (а то и одно) отклонений способны подсветить значимые проблемы, еще до появления каких-либо симптомов. Так как же понять полученные результаты? Рассказываем по пунктам.
1. Эпителий
Как известно, любой живой объект в природе имеет ограниченный срок жизни, по истечении которого он погибает «от старости».
Эпителий в гинекологическом мазке – это и есть слущенные «старые» клетки слизистой оболочки влагалища, цервикального или уретры (в зависимости от оцениваемого локуса). Которые могут присутствовать в материале в умеренных количествах.
Превышение нормативных пределов («много» или «обильно») может указывать на:
- воспаление, из-за которого клетки разрушаются в «повышенном объеме»,
- или избыток эстрадиола, стимулирующего пролиферацию (деление и рост) эпителиальных клеток, тем самым повышая их общую численность.
Уменьшение или отсутствие эпителия в мазке – на атрофические изменения, недостаток эстрадиола или избыток андрогенов.
Кроме того, ввиду зависимости эпителия от уровня половых гормонов, его количество в материале может сильно меняться в зависимости от дня цикла, начиная с единичного «в поле зрения» в самом начале – до умеренного и даже большого количества ближе к овуляции и во время нее.
А появление в мазке так называемых «ключевых клеток» (эпителий, «облепленный» мелкими кокковыми бактериями) – является маркером бактериального вагиноза.
2. Лейкоциты
«Норма» лейкоцитов в мазке также сильно зависит от стадии цикла и уровня половых гормонов, а также исследуемого локуса.
Так, за «максимум» для:
- влагалища принято 10,
- цервикального канала – до 25,
- а в уретре – не более 5 лейкоцитов в поле зрения.
Повышение показателя – очевидно, свидетельствует о воспалении, а полное отсутствие может иметь место в норме в самом начале цикла.
Слизь
Результат «отсутствует», «мало» или «умеренно» для этого показателя является нормой, что тоже связано с индивидуальными особенностями гормонального фона и циклом.
А вот «много» слизи в мазке – может свидетельствовать о том, что мазок взят в середине цикла, дисбиотических изменениях или избытке эстрогенов. Поэтому требует внимания специалиста или, как минимум, контроля в динамике.
Флора
Преобладающей флорой женских половых путей в норме у женщин репродуктивного возраста, как известно, являются лактобактерии (или палочки Дедерлейна).
Количество которых может быть от умеренного до обильного, в том зависимости, в том числе, от фазы менструального цикла.
Выявление в мазке «смешанной, преимущественно палочковой» флоры – также является вариантом нормой. Правда, если эти самые палочки – «мелкие, полиморфные», то есть морфологически соответствуют лактобактериям.
Преобладание в мазке кокковой флоры, и, особенно, если ее количество «обильно» – признак выраженных дисбиотических нарушений. Что требует более детальной оценки качества микрофлоры и, что важно, соотношения ее представителей между собой (к примеру, анализ «Фемофлор-16». Поскольку ассоциировано со множеством репродуктивных патологий (в том числе и скрытого характера).
Патологические элементы
Присутствия мицелия грибов, трихомонад, диплококков (в том числе и возбудитель гонореи), лептотрикса, мобилункуса и прочих патогенных микроорганизмов в нормальном мазке не допускается, даже в минимальном количестве. А их выявление – серьезный повод незамедлительно обратиться за лечением.
Поделиться статьей:
Остались вопросы?Исследование мазка
Самым распространенным является мазок на флору или общий мазок, при помощи которого врач определяет так называемую чистоту влагалища у женщины. Что он показывает? Этим способом можно определить состояние клеток эпителия и выявить наличие заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами, таких как вагинит, кандидоз (молочница), вагиноз, цервицит.
В результате проведения бактериоскопического исследования также диагностируются некоторые заболевания, передающиеся половым путем — гонорея, трихомониаз. В основе анализа лежит способность разных микроорганизмов окрашиваться в разные цвета в зависимости от степени устойчивости к воздействию антибиотиков.
Эта способность была открыта датским ученым Г. К. Грамом. В результате окрашивания биоматериала выявляются грамположительные (грам+) микроорганизмы, имеющие большую чувствительность к антибиотикам, и грамотрицательные (грам—), отличающиеся более тонкой и сложной в строении оболочкой и низкой чувствительностью к препаратам. Грамотрицательные микроорганизмы способны вызвать различные заболевания женской половой сферы.
Врач-лаборант в процессе проведения анализа под микроскопом подсчитывает количество по-разному окрашенных микроорганизмов, лейкоцитов, определяет форму бактерий, их размеры и расположение. В некоторых случаях исследуются неокрашенные (нативные) мазки, что позволяет обнаружить жгутиковые формы трихомонад. Кроме того, в рамках мазка на флору может проводиться так называемый посев на микрофлору. Он используется в тех случаях, когда возбудитель заболевания из-за его малой концентрации не может быть обнаружен под микроскопом и для определения рода и вида бактерий. В этом случае биоматериал, взятый из половых органов женщины, помещают в специальную питательную среду на основе желатина, и через определенное время изучают результат.
на заметку
Длительность культивирования посева зависит от того, присутствие какого микроорганизма необходимо выявить. Дольше всего созревает посев при хламидиозе — 15 дней.
Появление на питательном субстрате колоний микроорганизмов говорит о наличии заболевания. Метод посева также используется для определения стратегии лечения, поскольку во время созревания колонии можно выяснить, к воздействию каких групп антибиотиков она особенно неустойчива.
Мазок на скрытые инфекции. К скрытым инфекциям относят группу болезней, которые могут бессимптомно протекать на протяжении нескольких месяцев или даже лет, вызывая осложнения, а некоторых случаях — даже бесплодие. На сегодняшний день наиболее достоверным способом выявления скрытых инфекций является исследование мазка при помощи ПЦР (полимеразной цепной реакции). Этот метод используется для диагностики инфекций, не обнаруживаемых в общих мазках. Для проведения анализа берется секрет из шейки матки, влагалища или мочеиспускательного канала и производится многоэтапное повышение концентрации нуклеиновой кислоты и копирование отдельных фрагментов ДНК присутствующих в мазке микроорганизмов.
В результате врач может установить видовую и родовую принадлежность всех патогенных бактерий и их способность вызывать развитие заболеваний. В большинстве случаев ПЦР-анализ применятся при подозрении на наличие заболеваний, передающихся половым путем и имеющих на ранних стадиях практически бессимптомное течение.
Преимуществами метода являются:
- высокая точность определения возбудителя инфекции;
- возможность определения именно наличия вируса, а не продуктов его жизнедеятельности или распада;
- возможность постановки точного диагноза на основе всего одной клетки микроорганизма.
важно!
Метод ПЦР не выдает ложноположительных результатов, иными словами, положительных проб там, где отсутствует инфекция, не бывает.
Мазок на онкоцитологию, или тест по Папаниколау (пап-тест), позволяет выявить наличие онкологических заболеваний в шейке матки на ранних стадиях и вовремя начать терапию. Пап-тест определяет большинство воспалительных заболеваний, дисплазию эпителия и злокачественные образования.
Сдавать этот мазок рекомендуется ежегодно всем женщинам в возрасте от 21 до 65 лет. В случае если у женщины наблюдаются нарушения менструального цикла, воспалительные процессы цервикального канала, бесплодие, врач назначит мазок на онкоцитологию в обязательном порядке. Также рекомендуется пройти пап-тест при диагностировании диабета, ожирения 2−3 степени, в период планирования беременности, при приеме гормоносодержщих препаратов и наличии в организме вирусов генитального герпеса и папилломы.
При анализе мазка можно получить пять типов результата в зависимости от наличия и степени патологии. Первый тип — это отрицательный показатель, говорящий о том, что никаких отклонений от нормы в организме женщины нет, и она полностью здорова. При втором типе присутствует воспалительное заболевание, требующее лечения. Третий тип свидетельствует о наличии в эпителии единичных клеток с аномальным строением ядра. Четвертый тип — подозрение на злокачественное образование или эрозию шейки матки, генитальный герпес, папиллломовирусную инфекцию, паракератоз.
Пятый тип — наличие онкологического заболевания, требующего незамедлительного лечения. Следует помнить, что мазок показывает только степень изменения клеток, но не причину, их вызвавшую. Для постановки диагноза необходимы результаты других анализов, включая биопсию, кольпоскопию и гистологическое исследование.
Важно!
Если в мазке будут найдены атипичные клетки, то в заключении будет об этом написано, а также будет указан тип изменений. Если в расшифровке мазка на цитологию нет особых примечаний, это говорит о том, что в ходе исследования никаких патологий обнаружено не было.
Вагинальная микрофлора — Семейная Клиника
Вагинальная микрофлора (вагинальная флора) – микроорганизмы, которые населяют влагалище. Они являются частью общей человеческой микрофлоры. Количество и тип этой флоры определяет состояние здоровья женщины.
В норме в мазке на микрофлору должны преобладать бактерии рода Лактобациллы (лактобактерии), защищающие от патогенных микроорганизмов.
Лактобактерии производят молочную кислоту, которая, как предполагается, препятствует развитию патогенных бактерий (золотистого стафилококка, кишечной палочки и др.). Также они вырабатывают перекись водорода, обладающую широким противомикробным спектром действия, и различные бактериоцины, которые также убивают других бактерий, но имеют более узкое направленное действие.Правила забора материала для определения бактериальной микрофлоры
Биологический материал берется во время профилактического осмотра, а также при жалобах, таких как боль выше лобка, зуд и жжение в наружных половых органах, а также выделения, указывающие на воспалительный процесс.
Процедура забора биологического образца проходит безболезненно. Доктор вводит гинекологическое зеркало с центральным фиксатором, позволяющее расширить влагалище для осмотра поверхности шейки матки. Материал со стенки половых органов берется специальной щеточкой или ватным тампоном.
Перед походом к «женскому врачу» необходимо соблюдать определенные правила, повышающие достоверность и информативность анализа:
- за 2-3 дня не вступать в интимные отношения;
- запрещаются спринцевания;
- принимать ванную накануне визита к врачу не рекомендуется;
- при проведении гигиенических интимных процедур пользоваться специальным невысушивающим мылом;
- в период менструации посещение гинеколога не рекомендуется, лучше всего сдавать этот анализ сразу после ее прекращения;
- минимум 2-3 часа не опорожнять мочевой пузырь.
При снижении иммунитета (к примеру, во время беременности, гормонального сбоя, после перенесенных стрессов) количество лактобактерий снижается. Это влечет за собою ослабление женского организма, что чревато усилением предрасположенности к инфекционным заболеваниям половой сферы.
В норме, кроме лактобактерий, в мазке допускается присутствие гарднерелл и кандид в малом количестве. При снижении иммунитета патогенные микроорганизмы начинают быстро размножаться, подавляя «молочные» бактерии. Это приводит к нарушению кислотности, что чревато развитием дисбактериоза влагалища, а также гарденелезом и кандидозом.
В мазке на флору оцениваются следующие показатели:
- Клетки плоского эпителия, выстилающего стенки влагалища. В норме они единичные. Большое количество может указывать на воспаление. Отсутствие клеток плоского эпителия может говорить об атрофии слизистой при дефиците женских половых гормонов.
- Лейкоциты, функция которых обезвреживать возбудителей инфекции. Превышение их нормы (свыше 10 в поле зрения) также говорит о возможном воспалительном процессе;
- Грамположительные палочки – лактобактерии (лактобациллы) или палочки Додерлейна. Эти микроорганизмы являются основой влагалищной флоры здоровой женщины. Снижение количества лактобацилл указывает на дисбактериоз влагалища и сопровождает большинство инфекционных заболеваний половых органов;
- Слизь – секрет, выделяемый железами канала шейки матки. В стенках влагалища нет желез, вырабатывающих слизь. В норме количество слизи, выделяемое и впитываемое во влагалище, примерно равно, поэтому слизь обнаруживается лишь в небольших количествах. Увеличение количества слизи (более 5 мл в сутки) может говорить о воспалении в канале шейки матки;
- «Ключевые» клетки – это клетки плоского эпителия, которые отделились от слизистой и со всех сторон окружены бактериями. Преимущественно гарднереллами. Наличие этих клеток свидетельствует о влагалищном дисбактериозе;
- Различная флора, которая присутствует во влагалище. Указываются виды бактерий, которые были обнаружены при осмотре мазка под микроскопом. Палочковая флора считается нормой, поскольку лактобактерии имеют форму палочек. Коковая флора является тревожным признаком. Смешанная флора означает, что в мазке большое количество и палочковидных и кокковых микроорганизмов, что бывает при бактериальном вагинозе.
В норме они единичные. Большое количество может указывать на воспаление. Отсутствие клеток плоского эпителия может говорить об атрофии слизистой при дефиците женских половых гормонов. 
Преимущественно гарднереллами. Наличие этих клеток свидетельствует о влагалищном дисбактериозе;Исследование мазка на микрофлору – это важная и быстрая диагностика, позволяющая на ранних стадиях выявить серьезную патологию. Своевременное и правильное лечение позволит избавиться от заболевания, не допуская его перехода в хроническую стадию. Молодым девушка и женщинам, планирующим стать мамой, следует уделить большое внимание репродуктивному здоровью, чтобы в будущем не столкнуться с проблемой зачатия или благополучного вынашивания беременности.
В СЕМЕЙНОЙ КЛИНИКЕ Вы можете сдать мазок на определение микрофлоры влагалища, а также на онкоцитологию. Наши врачи клинической лабораторной диагностики квалифицированно выполнят анализы, а врачи-гинекологи
Мазок на флору у женщин
Мазок на флору у женщин берется в диагностических целях, этот анализ позволяет обнаружить атипичные клетки, оценить гормональный баланс и выявить признаки некоторых гинекологических заболеваний.
Назначают сдачу мазка женщинам в профилактических целях, а также в случае проявления симптомов болезней мочеполовой системы и при наличии жалоб: зуд в области влагалища, выделения, не связанные с менструацией, боль внизу живота. Обязательно такой анализ показан после длительного лечения антибиотиками и во время планирования беременности. Процедура безболезненна и не несет вреда.
Как проходит взятие мазка на флору
Чтобы результат мазка на флору был достоверным и информативным нужно соблюсти некоторые условия.
Что включает подготовка (за два дня до процедуры):
- Отказ от половой жизни;
- Запрет на свечи и таблетки для влагалища.
- Нельзя использовать моющие средства.
- Воздержание от купания в ванной.
- Нельзя проводить спринцевание.
- Мазок не сдается в период менструации.
Также гинекологи не рекомендуют своим пациенткам за несколько часов до взятия анализа мочиться. Берется мазок специальным стерильным шпателем со слизистой влагалища, шейки матки и мочеиспускательного канала во время гинекологического осмотра.
Норма показателей в мазке на флору
Мазок отправляют в лабораторию и после исследования выдаются результаты – написанные на листке буквы и цифры, обычным людям без медицинского образования они вряд ли будут понятны. На самом деле расшифровка анализа несложная, если известны нормативные показатели.
Нормальные показатели мазка взрослой здоровой женщины:
- L (лейкоциты) – в мочеиспускательном канале и влагалище таких клеток должно быть не более 10, а в районе шейки матки менее 30.
- Плоский эпителий – в поле зрения допускается наличие 15 клеток, если их больше, значит, прогрессирует воспаление, а недостаток свидетельствует о гормональном сбое.
- Слизь – может присутствовать в небольшом количестве.
- Палочки Дедерлейна – их должно быть много, недостаток лактобацилл признак нарушенной микрофлоры влагалища.
- Зоны, из которых берут мазок, обозначаются такими буквами: U (мочеиспускательный канал), V (вагина), C (шейка матки).
Во время анализа должна определяться и степень чистоты. Первая степень диагностируется у абсолютно здоровых женщин, в их микрофлоре 95% лактобактерий, а лейкоцитов и эпителия единичные клетки. Вторая степень практически не отличается от первой, но в небольшом количестве могут быть выявлены условно-патогенные бактерии. Третья степень чистоты свидетельствует о превышении численности условно-патологических бактерий (больше, чем палочек Дедерлейна). При четвертой степени лактобацил практически не обнаруживается, зато много бактериальной флоры, эпителия и лейкоцитов.
Лечить нужно два последних варианта.
Если в образцах мазка есть гонококки, трихомонады, грибы семейства Кандида или другие микроорганизмы, значит, в организме пациентки развивается воспалительное заболевание. В этом случае могут быть назначены дополнительные анализы для подбора наиболее эффективной терапии.
Что можно увидеть в результате исследования
Мазок на флору, если он проведен правильно и женщина придерживалась рекомендаций по подготовке, позволяет выявить воспалительные процессы, которые развиваются из-за наличия патогенных микроорганизмов.
Распространённые болезни, выявляемые в ходе исследования:
- Цервицит – поражает канал шейки матки. Патология имеет воспалительную природу.
- Вагинит – болезнь, которая пагубно влияет на влагалищные стенки.
- Кандидоз – молочница возникает из-за чрезмерного наличия во флоре женщины Кандид.
- Вагиноз бактериального типа – развивается в случае изменения состава микрофлоры влагалища.
Кроме того, анализ мазка на флору позволяет выявить ряд заболеваний, передающихся половым путем. Если были обнаружены гонококковые патогенные микроорганизмы, то это свидетельствует о развитии гонореи. Во время исследования можно обнаружить хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз и уреаплазмоз. Точный диагноз способен поставить только гинеколог, после изучения результатов анализов и тщательного осмотра пациентки.
Автор: Лаврова Нина Авенировна
Заместитель генерального директора по медицинской части
Окончила Ярославский государственный медицинский институт по специальности «Лечебное дело»
Медицинский опыт работы – 25 лет
Записаться к врачу
ОТЗЫВЫ КЛИЕНТОВ
Евгения
Была на приёме у гинеколога Ольги Александровны, была только один раз, но врач показался очень квалифицированный, далее судить буду в процессе лечения, и отпишусь.
Клиника платная, но деньги не дерут! Профессионализм на высшем уровне, а цены ниже чем во многих псевдоклиниках. Девушка на телефоне очень приятная и уважительно относится к клиентам, старается помочь и выгодно для…[…]Анастасия
Спасибо огромнейшее за Вашу работу! Все четко, ясно, понятно и быстро! Без лишних разговоров “о судьбе отечества”. Просто невероятно позитивные эмоции после общения![…]Инна
Прекрасный врач, имеет огромный опыт, может правильно поставить диагноз, все объяснить клиенту. К каждому находит свой подход.[…]Наталья
Спасибо от меня и всей моей семьи за профессионализм, поддержку, чуткое и внимательное отношение. Это – огромное счастье, что такие компетентные, умелые и талантливые, неравнодушные люди работают именно там, где они больше всего нужны. Ваши терпение, отзывчивость, чуткость, понимание, забота, доброжелательное и внимательное отношение, лечат и успокаивают.
Желаю крепкого…[…]Светлана
Хочу выразить огромную благодарность Чулак Ольге Александровне, за внимательность, инд. подход к пациенту, а так же профессионализм, доброжелательность и заботу! А ТАк же клинику Президент-мед и всему персоналу на ресепшн. Ольга Александровна- вы лучшая :)[…]Светлана
Хочу выразить огромную благодарность Чулак Ольге Александровне, за внимательность, инд. подход к пациенту, а так же профессионализм, доброжелательность и заботу! А ТАк же клинику Президент-мед и всему персоналу на ресепшн. Ольга Александровна- вы лучшая :)[…]Екатерина
Добрый день, хочу выразить свое восхищение Екатериной Викторовной, врач высшей категории, с первой секунды располагает пациента, чувствуется высокий профессионализм, очень доброжелательная, внимательная, реально всегда на связи со своими пациентами, что очень важно, так как в наше время мало кто может брать на себя ответственность.
Всем советую![…]Лабораторная диагностика бактериального вагиноза
Производительность, связанная с типом образца и ограничениями диагностических тестов
Существует две основные категории диагностических тестов на BV: клинические критерии и лабораторные исследования.
Наиболее широко признанными клиническими критериями являются «критерии Амселя» (23). Этот клинический диагноз требует соблюдения трех из следующих четырех критериев: во-первых, рН влагалища выше 4,5; во-вторых, наличие ключевой клетки во влагалищной жидкости; в-третьих, молочные однородные выделения из влагалища; и, наконец, выделение аминового (рыбного) запаха после добавления 10% гидроксида калия во влагалищную жидкость (23).
PH может быть определен непосредственно с помощью pH-палочек, помещенных на стенку влагалища, или с помощью тампона, которым прикасаются к pH-бумаге в диапазоне от pH 4,0 до pH 6,5. Затем мазок экстрагируют 0,2 мл физиологического раствора либо на предметном стекле, либо в пробирке; затем каплю экстракта помещают на предметное стекло. На другое предметное стекло помещают каплю 10% гидроксида калия. Затем тампон перемешивают в 10% гидроксиде калия и сразу оценивают на наличие рыбного запаха.Затем обе капли закрывают покровным стеклом и исследуют при 400-кратном увеличении с помощью светового микроскопа. Ключевые клетки идентифицируются как вагинальные эпителиальные клетки с таким толстым слоем бактерий, что периферические границы не видны. Если соблюдены три из четырех критериев, можно поставить клинический диагноз BV.
Для лабораторного метода тестирования предпочтительным образцом является нефиксированный вагинальный мазок, который отправляется в лабораторию для окрашивания по Граму стандартными методами.
Окрашенное слайд считывают, и количество морфотипов оценивают на основе стандартизированного метода подсчета баллов.Диагностические критерии, разработанные Spiegel et al (24) и позже модифицированные Nugent et al (25), представляют собой хорошо воспроизведенный стандартизированный метод оценки окрашивания по Граму (таблица).
ТАБЛИЦА 1
Система баллов (0-10) для окрашенных по Граму мазков из влагалища
| Оценка | Морфотипы Lactobacillus | Gardnerella и Bacteroides видов морфотипов | –|
|---|---|---|---|
| 0 | 4+ | 0 | 0 |
| 1 | 3+ | 1+ | 1+ или 2+ |
| 2 | 2+ | 2+ | 3+ или 4+ |
| 3 | 1+ | 3+ | |
| 4 | 0 | 4+ |
В методологии Nugent et al.
(25) мазок брали с боковой стенки влагалища и катали на предметном стекле.Затем мазки фиксировали нагреванием и окрашивали по Граму, используя сафранин в качестве контрастного красителя. Затем мазок оценивался на следующие морфотипы под масляной иммерсией (увеличение 1000x): большие грамположительные палочки (морфотипы lactobacillus), маленькие палочки с грамм-переменной (морфотипы G vaginalis ), маленькие грамотрицательные палочки ( Bacteroides видов). морфотипы), изогнутые палочки с грамм-переменной ( Mobiluncus видов морфотипов) и грамположительные кокки. Хотя грамположительные кокки не входят в систему оценки, некоторые лаборатории сообщают о них, если они присутствуют в значительном количестве.Повышенное количество грамположительных кокков не является частью нормальной микрофлоры влагалища. Следует отметить, что система оценки Ньюджента дала улучшение межцентрового согласия по сравнению с ранее опубликованными критериями (24), но стандартизированный метод оценки является наиболее важным подходом.
Оценка от нуля до трех считается нормальной, от четырех до шести – средней, а от семи до десяти – как BV. О промежуточной микрофлоре влагалища сообщают врачу для лечения в зависимости от клинического контекста.Тридцать два процента пациентов со средним баллом перейдут к BV и 30% к нормальной флоре. Многие авторы считают, что средний балл следует включать как ненормальный, учитывая высокую скорость перехода к BV. Решение о повторном обследовании или лечении основано на клиническом риске перехода к БВ (26). Эта система оценок хорошо коррелирует с клиническим заболеванием (18). Клиническая методология полезна, поскольку позволяет получить немедленный ответ в некоторых неотложных клинических ситуациях, но метод окраски по Граму кажется более точным (27–29).Однако во время беременности при разрыве плодных оболочек он имеет хорошую отрицательную прогностическую ценность (83%), но низкую чувствительность (30).
Были предложены альтернативные методы диагностики, но в настоящее время ни один из них не лучше стандартной методологии окрашивания по Граму.
Использование газожидкостной хроматографии, посевов влагалища и жидких препаратов мазков Папаниколау было предложено в качестве альтернативных методов диагностики из-за практических преимуществ отбора проб и обычной транспортировки в лабораторию.На момент написания это было сделано только в исследовательских условиях и потребовало бы значительных изменений в подходе к считыванию мазков. Существуют различные сообщения об общем отсутствии чувствительности, но разумной специфичности (31,32). На сегодняшний день методы нуклеиновой кислоты не доказали свою полезность для клинической диагностики сложного микробного дисбаланса, но могут оказаться полезными в будущем (33). Многие исследователи изучают генетическую основу для оценки сложной микробной флоры влагалища; есть некоторые предварительные надежды на использование оценок на основе шаперонина 60, в то время как другие используют подход, основанный на РНК.Ни один из этих методов в настоящее время не используется в клинических условиях из-за сложности и стоимости, но они могут быть очень ценными в будущем (34,35).
Таким образом, наиболее полезным современным диагностическим методом является окрашивание по Граму влагалища.
ФЕКАЛЬНОЕ МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ** | Пособия для студенческого оздоровительного центра
P urpose и Scope:
Микроскопическое исследование может использоваться для определения наличия лейкоцитов и эритроцитов в мазке кала.Это очень быстро предоставит врачу информацию о болезненном состоянии пациента. Определение наличия лейкоцитов может быть полезно при первоначальном обследовании пациентов с диареей, возможно, из-за бактериальной инфекции.
Реагенты и расходные материалы:
Набор красителей по грамму (Hardy Diagnostics)
Кристально-фиолетовый реагент
Реагент стабилизированный йод
Обесцвечивающее средство на основе 50% ацетона и спирта
0.4% Сафранин
Пятно для одного шага Райта
Дистиллированная вода
Предметные стекла для микроскопа
Микроскоп с масляной иммерсионной линзой
Промокательная бумага
Нагревательный блок
Хранение реагентов:
- Хранить комплект для окрашивания по Граму при комнатной температуре.
- Не использовать по истечении срока годности набора
Контроль качества:
См. Контроль качества процедуры окрашивания по Граму (СОП Micro-02)
Процедура
Окрашивание по Граму:
- Нанесите образец стула на чистое предметное стекло микроскопа с помощью палочки-аппликатора, чтобы получить тонкий однородный мазок.
- Дайте высохнуть на воздухе.
- Покровное стекло с кристально-фиолетовым реагентом на 1 минуту. Осторожно промойте водопроводной водой и дайте стечь.
- Покровное стекло с йодным реагентом на 1 минуту. Осторожно промойте водопроводной водой и дайте стечь.
- Промойте предметное стекло Обесцвечивателем, пока оно не потечет без цвета. Не перекрашивайте. Осторожно промойте водопроводной водой и дайте стечь,
- Покровное стекло с Safranin Counterstain на 30-60 секунд. Осторожно промойте водопроводной водой и дайте стечь. Поместите слайд между листами промокательной бумаги, чтобы он высох.
- Нанесите небольшую каплю масла на окрашенный образец и исследуйте предметное стекло под масляной иммерсионной линзой.
Поместите слайд между листами промокательной бумаги, чтобы он высох.Процедура влажной установки :
- Нанесите образец стула на чистое предметное стекло с помощью палочки-аппликатора, добавьте 1 или 2 капли физиологического раствора и тщательно эмульгируйте.
- Крепление с покровным стеклом. Удовлетворительный препарат должен иметь слегка непрозрачную плотность, но быть достаточно тонким, чтобы газетный оттиск можно было сквозь него видеть.
- Изучите предметное стекло, методично сканируя каждое поле всего покровного стекла с помощью объектива 10X, переходя в режим высокой влажности (40X) для более тщательного изучения подозрительных объектов.
Процедура окрашивания Райтса
- Нанесите образец стула на чистое предметное стекло микроскопа с помощью палочки-аппликатора, чтобы получить тонкий однородный мазок.
- Дайте высохнуть на воздухе.
- Используя одноразовую пипетку, покройте предметное стекло пятном Райта и дайте постоять примерно 20 секунд.
- Промыть дистиллированной водой.
- Наклоните и высушите на воздухе до полного высыхания.
- Осмотрите предметное стекло под маслом, используя масляную линзу 100X.
Устный перевод:
О наличии (или отсутствии) лейкоцитов и эритроцитов сообщать как:
- Лейкоцитов (или лейкоцитов) или эритроцитов (или красных кровяных телец) не обнаружено
- Редкие: 1-5 видели всего
- Occ (1+):> 5 просмотрено, <1 / HPF
- Мало (2+): 1/4 поля
- Mod (3+): 1/2 поля
- Многие (4+):> 1/2 поля
При исследовании мазка кала ищите «долю» лейкоцитов, поскольку стул содержит частицы пищи и мусор, которые могут напоминать лейкоциты.
Также сообщите о наличии аномальной флоры, включая дрожжи.
При исследовании мазка кала ищите «долю» лейкоцитов, поскольку стул содержит частицы пищи и мусор, которые могут напоминать лейкоциты.
Также сообщите о наличии аномальной флоры, включая дрожжи.
ССЫЛКИ
Бейли и Скотт, Диагностическая микробиология, 4-е издание, 1974 г., C.V. Мосби, Сент-Луис, стр. 392 – 393.
Вставка продукта, Hardy Diagnostics, Санта-Мария, Калифорния.
Наблюдатель медицинской лаборатории, сентябрь 1995 г., «Советы клинических экспертов; Фекальные лейкоциты »
Тодд, Сэнфорд и Дэвидсон, Клиническая диагностика и лечение с помощью лабораторных методов, 17-е издание, 1984 г., W. B. Saunders Company, Филадельфия, стр. 1212 – 1213.
5. Миллер Дж. Р., Барретт Л. Дж., Котлофф К., Геррант Р. Л.. Экспресс-тест на инфекционно-воспалительный энтерит. Arch Intern Med. 1994; 154: 2660-2664.
Corynebacterium diphtheriae – обзор
Естественная история, патогенез и патология
Corynebacterium diphtheriae – грамположительная, тонкая, неподвижная, не спорулирующая палочка.
На основе морфологии и биохимических характеристик колонии выделяются четыре биотипа C. diphtheriae (gravis, mitis, intermediate и belfanti). Некоторые штаммы производят мощный экзотоксин дифтерии. Прежде чем C. diphtheriae станет токсигенным, он должен быть лизогенизирован определенным бактериофагом. Коринебактериофаг несет структурный ген токсина ( tox ). Токсин-продуцирующие штаммы всех биотипов продуцируют идентичный дифтерийный экзотоксин [1]. Между биотипами не было продемонстрировано стойких различий в патогенности или тяжести заболевания.Токсигенные штаммы C. diphtheriae не являются инвазивными, но вызывают у восприимчивых людей локализованное токсин-опосредованное заболевание, колонизируя слизистую оболочку верхних дыхательных путей или кожные раны и язвы. Редко могут быть инфицированы другие участки слизистой оболочки, например конъюнктива, ухо и влагалище. После вдыхания микроорганизмы размножаются в месте колонизации и вызывают воспалительную реакцию в слизистой оболочке носоглотки, ротоглотки, гортани или трахеи.
Воспаление характеризуется выраженной нейтрофильной инфильтрацией, закупоркой сосудов и интерстициальным отеком.Лизогенизированные организмы вырабатывают дифтерийный токсин, который подавляет внутриклеточный синтез белка и вызывает местный эпителиальный некроз с густым фибринозно-гнойным экссудатом. Некротический мусор, экссудат, белые и красные кровяные тельца, фибрин и бактерии коагулируют, образуя грязно-серую и прилипшую к слизистой оболочке псевдомембрану. Расширение псевдомембраны может привести к опасной для жизни обструкции дыхательных путей. Попытки удалить псевдомембрану обычно приводят к кровотечению на месте. При лечении или контроле инфекции мембрана может отслоиться от ложа слизистой оболочки сосудов и привести к кровотечению и асфиксии, или она может отхаркиваться.Токсин дифтерии может абсорбироваться из очага инфекции в кровоток и транспортироваться в отдаленные места. Системная абсорбция увеличивается с расширением локального воспалительного процесса и увеличением псевдомембраны.
В отсутствие циркулирующих нейтрализующих антител к дифтерийному токсину может произойти обширное опосредованное токсином повреждение органов-мишеней, особенно в сердце и периферической нервной ткани. Поражение миокарда проявляется миокардитом, который характеризуется отеком, инфильтрацией мононуклеарных клеток и жировыми изменениями, а также очаговым некрозом миокарда и его проводящей системы.Полинейропатия возникает в результате дегенерации миелиновой оболочки и осевого цилиндра черепных или периферических нервов. Иногда острый некроз канальцев почек может приводить к почечной недостаточности [4, 5].
Инфекция, вызванная нетоксигенным вирусом C. diphtheriae , может быть связана с болью в горле без образования псевдомембран, но с инвазивным заболеванием. Бактериемия, эндокардит, аневризмы, остеомиелит и септический артрит были зарегистрированы среди групп наркоманов, алкоголиков, бездомных и австралийских аборигенов.
Лаборатория 6: Окрашивание по Граму и окрашивание капсулы
A.
Окрашивание по Граму
ОБСУЖДЕНИЕ
Окрашивание по Граму является наиболее широко используемой процедурой окрашивания в бактериологии. Его называют дифференциальным красителем , поскольку он различает грамположительные и грамотрицательные бактерии. Бактерии, окрашивающие пурпурный с помощью процедуры окрашивания по Граму, называются грамположительными; те, которые окрашивают в розовый цвет , считаются грамотрицательными .Термины положительный и отрицательный не имеют ничего общего с электрическим зарядом, а просто обозначают две различные морфологические группы бактерий.
Грамположительные и грамотрицательные бактерии окрашиваются по-разному из-за фундаментальных различий в структуре их клеточных стенок. Стенка бактериальной клетки служит для придания организму его размера и формы, а также для предотвращения осмотического лизиса. Материал в клеточной стенке бактерий, который придает жесткость, – это пептидогликан.
На электронных микрофотографиях грамположительная клеточная стенка выглядит как широкая плотная стенка толщиной 20-80 нм, состоящая из множества соединяющихся слоев пептидогликана (Рисунки 1A и 1B).Химически от 60 до 90% грамположительной клеточной стенки составляет пептидогликан. В стенку грамположительных клеток вплетены тейхоевые кислоты. Тейхоевые кислоты, которые проходят через остальную часть клеточной стенки и за ее пределы, состоят из полимеров глицерина, фосфатов и рибита сахарного спирта. Некоторые из них имеют липид (липотейхоевую кислоту). Наружная поверхность пептидогликана усеяна белками, которые различаются в зависимости от штамма и вида бактерии.
Стенка грамотрицательных клеток , с другой стороны, содержит только 2-3 слоя пептидогликана и окружена внешней мембраной, состоящей из фосфолипидов, липополисахаридов, липопротеинов и белков (Рисунки 2A и 2B).Только 10-20% грамотрицательной клеточной стенки составляет пептидогликан.
Фосфолипиды расположены в основном во внутреннем слое внешней мембраны, как и липопротеины, соединяющие внешнюю мембрану с пептидогликаном. Липополисахариды, расположенные во внешнем слое внешней мембраны, состоят из липидной части, называемой липидом А, встроенной в мембрану, и полисахаридной части, выходящей наружу от бактериальной поверхности. Наружная мембрана также содержит ряд белков, которые различаются в зависимости от штамма и вида бактерии.
Для получения дополнительной информации о грамотрицательной и грамположительной клеточной стенке см. Следующие учебные объекты в вашем руководстве по лекциям:
Процедура окрашивания по Граму включает четыре основных этапа:
1. Бактерии сначала окрашивают основным красителем кристаллический фиолетовый . И грамположительные, и грамотрицательные бактерии сразу окрашиваются и становятся пурпурными после этого шага.
2. Затем бактерии обрабатывают раствором йода Грама .
Это позволяет лучше удерживать пятно за счет образования нерастворимого комплекса кристаллического фиолетового и йода. После этого шага и грамположительные, и грамотрицательные бактерии остаются фиолетовыми.
3. Затем добавляют обесцвечивающее средство по Граму , смесь этилового спирта и ацетона . Это дифференциальный шаг. Грамположительные бактерии сохраняют комплекс кристаллического фиолетово-йода, в то время как грамотрицательные обесцвечиваются.
4. Наконец, наносится контрастное пятно сафранин (также основной краситель).Поскольку грамположительные бактерии уже окрашены в пурпурный цвет, контрастное окрашивание на них не действует. Обесцвеченные грамотрицательные бактерии непосредственно окрашиваются сафранином. Таким образом, грамположительные выглядят фиолетовыми, а грамотрицательные – розовыми.
В соответствии с современной теорией окрашивания по Граму считается, что у грамположительных бактерий кристаллический фиолетовый и йод объединяются с образованием более крупной молекулы, которая осаждается внутри клетки.
Затем смесь спирта и ацетона вызывает дегидратацию многослойного пептидогликана, тем самым уменьшая пространство между молекулами и заставляя клеточную стенку улавливать комплекс кристаллического фиолетового и йода внутри клетки.В случае грамотрицательных бактерий смесь спирт / ацетон, являясь липидным растворителем, растворяет внешнюю мембрану клеточной стенки и может также повредить цитоплазматическую мембрану, к которой прикреплен пептидогликан. Несколько слоев пептидогликана неспособны удерживать комплекс кристаллического фиолетового йода, и клетка обесцвечивается.
Важно отметить, что грамположительность (способность удерживать пурпурный кристаллический фиолетово-йодный комплекс) – это не явление «все или ничего», а вопрос степени.Существует нескольких факторов, которые могут привести к грамположительному окрашиванию микроорганизмов грамотрицательным образом:
1. Используемые метод и приемы. Перегрев во время термофиксации, чрезмерное обесцвечивание спиртом и даже слишком частое мытье водой между этапами может привести к потере грамположительными бактериями комплекса кристаллического фиолетового и йода.
2. Возраст культуры. Культуры старше 24 часов могут потерять способность удерживать комплекс кристаллический фиолетовый-йод.
3. Сам организм. Некоторые грамположительные бактерии более способны удерживать комплекс кристаллический фиолетовый и йод, чем другие.
Следовательно, при окрашивании по Граму необходимо использовать очень точные методы и интерпретировать результаты осмотрительно.
ОРГАНИЗМЫ
Триптиказа Посевы на пластинах соевого агара Escherichia coli (небольшая грамотрицательная палочка) и Staphylococcus epidermidis (грамположительный кокк с расположением стафилококков).
ПРОЦЕДУРА (выполняется индивидуально)
1. Escherichia coli
а. Выполните тепловую фиксацию мазка Escherichia coli следующим образом:
1. Используя бутылку-капельницу с деионизированной водой , которая находится в стойке для окрашивания , поместите 1/2 капли воды нормального размера на чистое предметное стекло, прикоснувшись пипеткой к предметному стеклу (Рисунок 1).
Также можно использовать стерилизованную петлю для посева, чтобы нанести на предметное стекло каплю деионизированной воды.
2. Используя стерильную петлю для посева, асептически удалите небольшое количество культуры с поверхности агара и осторожно прикоснитесь к ней 2–3 раза к капле воды , пока вода не станет заметно мутной ( Фигура 2). Для окрашивания по Граму необходим хороший мазок с правильным количеством бактерий.
- Слишком большое количество бактерий на предметном стекле может привести к обесцвечиванию; слишком мало может привести к обесцвечиванию .
3. Сожгите оставшиеся бактерии в петле для посева. Если в воду добавить слишком много культуры, вы не увидите окрашенных отдельных бактерий, и у вас может не получиться надежное окрашивание по Граму.
4. После того, как инокуляционная петля остынет, распределите суспензию примерно по половине предметного стекла , чтобы сформировать тонкую пленку.
Правильно приготовленный мазок с нужным количеством бактерий должен выглядеть так, как показано на рис. 3.
5. Дайте этой тонкой суспензии полностью высохнуть на воздухе (рис. 4). Перед термической фиксацией предметного стекла мазок должен полностью высохнуть!
6. Чтобы закрепить бактерии на предметном стекле путем нагревания, возьмите высушенное на воздухе предметное стекло пинцетом для покровного стекла и удерживайте нижнюю часть предметного стекла напротив мазка рядом с отверстием микроинсинератора в течение 10 секунд. (Рис. 5) как продемонстрировал ваш инструктор. Если предметное стекло недостаточно нагреть, все бактерии смоются. При его перегреве структурная целостность бактерий может быть нарушена.
г.Окрасьте кристалл-фиолетовый Hucker на за одну минуту (Рисунок 6). Осторожно промойте водой (Рисунок 7). Стряхните лишнюю воду, но не промокните насухо между этапами .
г. Окрашивайте раствором йода по Граму на в течение одной минуты (Рисунок 8) и осторожно промойте водой .
г. Для обесцвечивания поднимите слайд и дайте обесцвечивателю Gram стечь по слайду до тех пор, пока фиолетовый не перестанет течь в нижней части слайда (Рисунок 9).
- Убедитесь, что весь мазок равномерно обесцвечен и что вы не обесцвечиваете его слишком сильно или не слишком обесцвечивать .
- Немедленно промыть водой .
эл. Окрашивайте сафранином на в течение одной минуты (Рисунок 10). Когда вы смываете излишки сафранина, будьте очень осторожны, осторожно и ненадолго промойте , так как можно вымыть часть сарфанина из бактерий.
ф. Промокните (рис.
11) и наблюдайте с помощью иммерсионной микроскопии в масле.
2. Staphylococcus epidermidis
а. Выполните термофиксацию мазка Staphylococcus epidermidis следующим образом:
1. Используя бутылку-капельницу с деионизированной водой , которая находится в стойке для окрашивания , поместите 1/2 капли воды нормального размера на чистое предметное стекло, прикоснувшись пипеткой к предметному стеклу (Рисунок 1). Также можно использовать стерилизованную петлю для посева, чтобы нанести на предметное стекло каплю деионизированной воды.
2. Используя стерильную петлю для посева, асептически удалите небольшое количество культуры с поверхности агара и осторожно прикоснитесь к ней 2–3 раза к капле воды , пока вода не станет заметно мутной ( Фигура 2).
- Слишком большое количество бактерий на предметном стекле может привести к обесцвечиванию; слишком мало может привести к обесцвечиванию .
3. Сожгите оставшиеся бактерии в петле для посева. Если в воду добавить слишком много культуры, вы не увидите окрашенных отдельных бактерий, и у вас может не получиться надежное окрашивание по Граму.
4. После того, как инокуляционная петля остынет, распределите суспензию примерно по половине предметного стекла , чтобы сформировать тонкую пленку (Рисунок 3).
5. Дайте этой тонкой суспензии полностью высохнуть на воздухе (Рисунок 4). Перед термической фиксацией предметного стекла мазок должен полностью высохнуть!
6. Чтобы закрепить бактерии на предметном стекле путем нагревания, возьмите высушенное на воздухе предметное стекло пинцетом для покровного стекла и удерживайте нижнюю часть предметного стекла напротив мазка рядом с отверстием микроинсинератора в течение 10 секунд. (Рис. 5) как продемонстрировал ваш инструктор.Если предметное стекло недостаточно нагреть, все бактерии смоются.
При его перегреве структурная целостность бактерий может быть нарушена.
г. Окрасьте кристалл-фиолетовый Hucker на за одну минуту (Рисунок 6). Осторожно промойте водой (Рисунок 7). Стряхните лишнюю воду, но не промокните насухо между этапами .
г. Окрашивайте раствором йода по Граму на в течение одной минуты (Рисунок 8) и осторожно промойте водой .
г. Для обесцвечивания поднимите слайд и дайте обесцвечивателю Gram стечь по слайду до тех пор, пока фиолетовый не перестанет течь в нижней части слайда (Рисунок 9).
- Убедитесь, что весь мазок равномерно обесцвечен и что вы не обесцвечиваете его слишком сильно или не слишком обесцвечивать .
- Немедленно промыть водой .
эл. Окрашивайте сафранином на в течение одной минуты (Рисунок 10). Когда вы смываете излишки сафранина, будьте очень осторожны, осторожно и ненадолго промойте , так как можно вымыть часть сарфанина из бактерий.
ф. Промокните и наблюдайте с помощью иммерсионной микроскопии в масле.
3. Обязательно вылейте использованный краситель из лотка для окрашивания в контейнер для отработанного красителя, а не , а не , в раковину .
B. КАПСУЛЬНОЕ ПЯТНО
ОБСУЖДЕНИЕ
Многие бактерии выделяют слизистую вязкую оболочку, называемую капсулой или гликокаликсом.Обычно он состоит из полисахарида, полипептида или того и другого.
Способность производить капсулы – это унаследованное свойство организма, но капсула не является абсолютно необходимым клеточным компонентом. Капсулы часто производятся только при определенных условиях выращивания.
Капсулы, хотя и не являются необходимыми для жизни, помогают бактериям выжить в природе. Капсулы помогают многим патогенным и нормальным бактериям флоры первоначально противостоять фагоцитозу фагоцитарными клетками хозяина.В почве и воде капсулы помогают предотвратить поглощение бактерий простейшими. Капсулы также помогают многим бактериям прилипать к поверхностям и, таким образом, сопротивляться смыванию. Это также позволяет многим бактериям образовывать биопленки. Биопленка состоит из слоев бактериальных популяций, прикрепленных к клеткам-хозяевам и встроенных в общую капсульную массу.
Для получения дополнительной информации о бактериальных капсулах см. Следующие учебные объекты в вашем Руководстве по лекциям:
ОРГАНИЗМ
Культура бульона из обезжиренного молока Enterobacter aerogenes .Обезжиренное молоко обеспечивает необходимые питательные вещества для производства капсул, а также обеспечивает слегка окрашиваемый фон.
ПРОЦЕДУРА (выполняется индивидуально)
1. Перемешайте культуру бульона из обезжиренного молока петлей и поместите 2-3 петли из Enterobacter aerogenes на предметное стекло микроскопа.
2. Используя петлю для посева, распределите образец так, чтобы покрыть примерно один дюйм предметного стекла .
3.Дайте ему полностью высохнуть на воздухе. Не нагревайте фиксатор . Капсулы хорошо прилипают к стеклу, а нагревание может разрушить капсулу.
4. Окрашивание кристально-фиолетовым на в одну минуту .
5. Смыть излишки красителя 20% -ным раствором сульфата меди .
6. Стряхните избыток раствора сульфата меди и немедленно просушите промоканием.
7. Наблюдать с помощью масляной иммерсионной микроскопии . Организм и молоко, высушенное на предметном стекле, заберут пурпурный краситель, а капсула останется бесцветной.
8. Убедитесь, что вы аккуратно вылили использованный краситель из лотка для окрашивания в контейнер для отработанного красителя, а не , а не , в раковину .
9. Обратите внимание на демонстрационное окрашивание капсулы Streptococcus lactis , инкапсулированной бактерии, которая является нормальной флорой молока.
РЕЗУЛЬТАТЫ
A. Окрашивание по Граму
Сделайте рисунки каждой бактерии на препарате для окрашивания по Граму.
Б.Капсульное пятно
Сделайте рисунок препарата для окрашивания капсулы Enterobacter aerogenes и демонстрационного окрашивания капсулы Streptococcus pneumoniae .
Что делает ацетоновый спирт с пятном по грамму?
Окрашивание по Граму – это процедура дифференциального окрашивания, которая показывает, какие бактерии являются грамположительными или грамотрицательными в зависимости от их цвета окраски.
Ацетоновый спирт – один из реагентов, используемых в этом процессе для обеспечения цветовой дифференциации.Грамположительные бактерии имеют толстый пептидогликановый слой и окрашиваются в фиолетовый цвет, в то время как грамотрицательные микроорганизмы практически не имеют пептидогликанового слоя и окрашиваются в розовый цвет.
Первичное окрашивание – кристаллический фиолетовый
После приготовления слайда с бактериальным образцом сначала используют кристаллический фиолетовый для окрашивания образца. На этом этапе грамположительные и грамотрицательные бактерии станут фиолетовыми. Обычно кристаллический фиолетовый наносят на предметное стекло на 30 секунд, прежде чем смыть водой излишки пятна.Кристаллический фиолетовый может немного прилипать к слоям пептидогликана, поэтому не все первичные пятна будут смыты водой.
Протравливающий йод
Затем к образцу добавляют йод на одну минуту. Он действует как протрава, фиксирующая красители в процессе окрашивания. Йод выполняет эту функцию, связываясь с кристаллическим фиолетовым и создавая нерастворимый комплекс, который намного лучше прилипает к толстому слою пептидогликана, обнаруженному в грамположительных бактериальных клетках, чем просто к кристаллическому фиолетовому.После добавления йода промывка водой не выполняется.
Спирт для обесцвечивания
В качестве обесцвечивающего агента можно использовать ацетон или этиловый спирт. Спирт растворяет липиды, обнаруженные во внешней клеточной мембране грамотрицательных бактерий, позволяя комплексу кристаллического фиолетового и йода вытекать из более тонкого слоя пептидогликана. Спирт добавляется от 10 до 20 секунд; его выливают на предметное стекло до тех пор, пока весь йод не будет смыт и стоки не станут бесцветными.На этом этапе процесса окрашивания по Граму грамотрицательные бактерии бесцветны, в то время как грамположительные бактерии все еще сохраняют кристаллический фиолетовый цвет. После завершения слайд необходимо промыть водой, чтобы остановить обесцвечивание.
Контрастное пятно-сафранин
Затем добавляется сафранин для увеличения видимости и контраста с бесцветными грамотрицательными бактериями. Пятно заставляет эти бактерии казаться розовыми под микроскопом. Поскольку краситель добавляется ко всему образцу, он также окрашивает грамположительные бактерии, но более темный цвет кристаллического фиолетового скрывает более светлый розовый цвет сафранина.После того, как образец предметного стекла был залит сафранином в течение примерно минуты, воду используют для смывания лишних пятен, которые не прилипли к бактериальным клеткам.
Лабораторная диагностика инфекций мочевыводящих путей у взрослых пациентов | Клинические инфекционные болезни
Абстрактные
Инфекции мочевыводящих путей (ИМП) относятся к числу наиболее распространенных бактериальных инфекций и составляют значительную часть рабочей нагрузки лабораторий клинической микробиологии.Кишечные бактерии (в частности, Escherichia coli ) остаются наиболее частой причиной ИМП, хотя распределение патогенов, вызывающих ИМП, меняется. Более важным является повышение устойчивости к некоторым антимикробным средствам, в частности устойчивости к триметоприм-сульфаметоксазолу, наблюдаемой у E. coli . Врачи отличают ИМП от других заболеваний, которые имеют схожие клинические проявления, с помощью небольшого количества тестов, ни один из которых, при индивидуальном использовании, не обладает адекватной чувствительностью и специфичностью.Среди диагностических тестов анализ мочи полезен в основном для исключения бактериурии. Посев мочи может не требоваться при обследовании амбулаторных пациентов с неосложненными ИМП, но он необходим амбулаторным пациентам, у которых рецидивирующие ИМП, неэффективное лечение или осложненные ИМП, а также для стационарных пациентов, у которых развиваются ИМП.
Инфекции мочевыводящих путей (ИМП) – одни из самых распространенных бактериальных инфекций. Было подсчитано, что симптоматические ИМП приводят к 7 миллионам обращений в поликлиники, 1 миллиону обращений в отделения неотложной помощи и 100 000 госпитализаций ежегодно [1].ИМП стали самой распространенной внутрибольничной инфекцией, на которую приходится до 35% внутрибольничных инфекций, и они являются второй по частоте причиной бактериемии у госпитализированных пациентов [2, 3]. Ежегодные затраты системы здравоохранения США, связанные только с внебольничными ИМП, оцениваются примерно в 1,6 миллиарда долларов [4].
ИМП сложны не только из-за большого количества инфекций, которые происходят каждый год, но и из-за того, что диагностика ИМП не всегда проста.Врачи должны отличать ИМП от других заболеваний, которые имеют схожую клиническую картину, некоторые ИМП протекают бессимптомно или имеют атипичные признаки и симптомы, а для диагностики ИМП у пациентов с нейтропенией (у которых обычно нет пиурии) могут потребоваться другие диагностические критерии, чем используемые. для общей популяции пациентов. Из-за этих факторов врачи часто полагаются на небольшое количество несовершенных лабораторных тестов для улучшения клинических впечатлений; даже если клинический диагноз однозначен, врачи могут назначить лабораторные анализы для определения причины инфекции и / или предоставить изоляты для тестирования чувствительности к противомикробным препаратам.Поэтому неудивительно, что лабораторное исследование образцов мочи составляет значительную часть рабочей нагрузки во многих больничных лабораториях. Фактически, во многих клинических лабораториях посев мочи является наиболее распространенным типом посева, составляя 24–40% представленных культур; 80% этих посевов мочи получают в амбулаторных условиях.
Цель этого обзора – обобщить лабораторную диагностику рутинных ИМП с использованием современных методов диагностики.Обзор не будет охватывать диагностику ИМП у особых групп пациентов – тема, заслуживающая отдельного обзора.
Причины ИМП
Этиологические агенты внебольничных и внутрибольничных ИМП различаются (таблица 1) [5–14]. Было опубликовано лишь ограниченное количество данных об изменениях частоты возбудителей заболеваний среди амбулаторных пациентов. Кишечные бактерии (в частности, Escherichia coli ) были и остаются наиболее частой причиной ИМП, хотя есть некоторые свидетельства того, что процент ИМП, вызываемых E.coli уменьшается [6, 15]. Напротив, с 1980 г. сообщалось о значительных изменениях причин внутрибольничных ИМП. Bronsema et al. [13] сообщили, что с 1980 по 1991 год процент ИМП, вызванных видами E. coli, Proteus и видами Pseudomonas , снизился, тогда как процент ИМП, вызванных дрожжами, стрептококками группы B и Klebsiella pneumoniae. увеличился. Weber et al. [6] сообщили о различных изменениях в возбудителях ИМП, с уменьшением процента ИМП, вызванных Enterobacter видов, но с увеличением процента ИМП, вызванных Acinetobacter видов и Pseudomonas aeruginosa . Candida albicans является наиболее частой причиной фунгурии, за ней следуют Candida glabrata, Candida tropicalis, Candida parapsilosis, Candida krusei и другие дрожжи [16].
Таблица 1
Процентное распределение этиологических агентов инфекций мочевыводящих путей среди амбулаторных и стационарных пациентов по патогенам.
Таблица 1
Процентное распределение этиологических агентов инфекций мочевыводящих путей среди амбулаторных и стационарных пациентов по патогенам.
Сбор, транспортировка и обработка образцов
Сбор образцов . Надлобковая аспирация – лучший метод предотвращения заражения образцов бактериями дистального отдела уретры. Этот метод сбора используется нечасто, поскольку он не показан клинически (за исключением редких случаев), является инвазивным и неудобным, а также требует слишком много времени и ресурсов, чтобы быть практичным. Сбор мочи с использованием одного катетера (метод прямого катетера) является следующим лучшим методом для получения образцов мочи с минимальным загрязнением, но, опять же, он не показан клинически для большинства пациентов, потому что это слишком трудоемко и дорого для рутинной работы. использовать, и это инвазивно.Он имеет дополнительные недостатки, потому что процесс введения катетера через уретру может привести к попаданию бактерий в мочевой пузырь (и тем самым вызвать ИМП), и сообщалось о редких осложнениях.
Большинство образцов мочи берутся у взрослых пациентов с помощью метода чистого улова в середине потока. Эта методика имеет следующие преимущества: она неинвазивна и не вызывает дискомфорта, проста и недорога, ее можно применять практически в любых клинических условиях, нет риска занесения бактерий в мочевой пузырь путем катетеризации и нет риска осложнений. .Количество колоний в образцах мочи, собранных этим методом, достаточно хорошо коррелирует с таковыми в образцах, собранных с помощью надлобковой аспирации или прямой катетеризации [15]. Очевидным недостатком этого метода является то, что образец мочи проходит через дистальный отдел уретры и может быть загрязнен комменсальными бактериями. Простые процедуры, разработанные для снижения уровня заражения, включают очищение кожи и слизистых оболочек, прилегающих к отверстию уретры перед мочеиспусканием, позволяя первой части потока мочи пройти в туалет, и сбор мочи для посева из среднего потока [17 ].Хотя метод «чистого улова» в середине потока принят и широко используется, имеющиеся данные свидетельствуют о том, что процедуры очистки не могут значительно снизить уровень загрязнения мочи и, следовательно, могут быть ненужными в качестве рутинной процедуры [18–23]. Могут возникнуть трудности с надлежащим отбором образцов у пожилых пациентов, а также у пациентов с физическими или иными нарушениями, что повышает важность правильного сбора образцов во избежание контаминации.
Как обсуждается ниже, правильная обработка и обращение с образцами мочи, а также правильная интерпретация результатов анализа зависят от метода, используемого для сбора образца.Поэтому для клиницистов очевидна важность указать метод сбора в бланке заявки на тестирование. Другая информация, которая должна быть включена в бланк заявки на исследование, включает дату и время сбора образца, демографические данные пациента и любую клинически значимую информацию (например, лечился ли пациент противомикробными препаратами или были ли анатомические аномалии, камни или мочевой катетер).
Транспортировка образцов .Несколько исследований продемонстрировали неблагоприятное влияние задержек с транспортировкой или обработкой образцов мочи на их качество [24–26]. В каждом исследовании образцы мочи помещали в чашки в течение 2 часов после сбора, а затем снова помещали в чашки после задержек до 24 часов; результаты сравнивали, чтобы определить, привели ли задержки в посеве к увеличению количества колоний. В каждом из исследований некоторые из отложенных культур показали увеличение количества колониеобразующих единиц (КОЕ) на мл до> 10 5 КОЕ / мл, что привело к ложноположительным результатам.Следует отметить, что эти 3 исследования были выполнены до публикации текущих критериев интерпретации количественных посевов мочи, и что влияние на интерпретацию было бы еще больше, если бы использовалось количество колоний 10 2 или 10 3 КОЕ / мл. определить вероятную инфекцию у конкретных пациентов [15]. На основании результатов этих и других подобных исследований в настоящее время рекомендуется помещать образцы мочи на чашки в течение 2 часов после сбора, если образцы не были охлаждены или хранились в консерванте [17].
Обработка образцов . Обычные посевы мочи должны быть посеяны с использованием калиброванных петель для полуколичественного метода. Преимущество этого метода заключается в предоставлении информации о количестве КОЕ / мл, а также в предоставлении изолированных колоний для идентификации и тестирования чувствительности. Типы сред, используемых для обычных культур, должны быть ограничены кровяным агаром и агаром МакКонки. Для образцов мочи, взятых у амбулаторных пациентов, нет необходимости в рутинной инокуляции среды, селективной для грамположительных бактерий, поскольку почти все ИМП у амбулаторных пациентов вызываются аэробными и факультативными грамотрицательными бактериями (таблица 1) [27, 28] .Даже в группах пациентов, у которых Staphylococcus saprophyticus является частой причиной ИМП, нет необходимости использовать селективные среды. Напротив, образцы мочи, полученные от госпитализированных пациентов, могут содержать энтерококки, которые стали второй по частоте причиной внутрибольничных инфекций. Лаборатории могут захотеть рассмотреть возможность посева образцов мочи, полученных от госпитализированных пациентов или пациентов, у которых есть подозрение на грамположительную бактериальную инфекцию, но не подтвержденную документально, в среду, которая является селективной для грамположительных кокков.Такая среда, как фенилэтиловый спирт, подавляет рост роящихся видов Proteus и других грамотрицательных бацилл, которые могут перерастать грамположительные кокки в образце. Перед считыванием посевы мочи необходимо инкубировать в течение ночи при температуре от 35 ° C до 37 ° C на воздухе. Инкубация обычных культур мочи в течение 48 часов не дает дополнительных преимуществ при условии, что образцы инкубируются в течение полных 24 часов и что образцы мочи, содержащие <10 4 уропатогенов, или образцы от пациентов с подозрением на фунгурию, инкубируются в течение 48 часов [29– 31].
Большинство патогенных дрожжей хорошо растут на чашках с кровяным агаром, поэтому нет необходимости использовать селективные грибковые среды для посева мочи, даже для образцов, полученных от пациентов с подозрением на фунгурию. Селективные грибковые среды могут использоваться в тех редких случаях, когда существует высокая клиническая вероятность того, что ИМП вызвана более привередливыми дрожжами или плесенью. Образцы мочи, полученные от пациентов с подозрением на микобактериальные инфекции мочевыводящих путей, следует обработать и поместить в соответствующие микобактериальные среды [32].
Некультуральные методы лабораторной диагностики ИМП
Обнаружение бактериурии с помощью микроскопии мочи . Бактериурию можно обнаружить микроскопически с помощью окрашивания по Граму нецентрифугированных образцов мочи, окрашивания по Граму центрифугированных образцов или прямого наблюдения бактерий в образцах мочи. Окраска по Граму нецентрифугированных образцов мочи – простой метод. Объем мочи наносят на предметное стекло микроскопа, дают ему высохнуть на воздухе, окрашивают красителем по Граму и исследуют под микроскопом.Рабочие характеристики теста четко не определены, поскольку для определения положительного результата теста использовались разные критерии. В одном исследовании было обнаружено, что тест чувствителен к обнаружению ≥10 5 КОЕ / мл, но нечувствителен к обнаружению меньшего количества бактерий (таблица 2) [28]. Другие исследователи обнаружили, что этот тест имеет низкую чувствительность для выявления ИМП [33–42].
Таблица 2
Характеристики окрашивания по Граму для выявления бактериурии.
Таблица 2
Рабочие характеристики окрашивания по Граму для выявления бактериурии.
Окрашивание мочи по Граму имеет важное преимущество, так как дает немедленную информацию о природе инфекционных бактерий или дрожжей (редко инфекционные агенты, такие как микроспоридии) и, таким образом, помогает врачу выбрать эмпирическую антимикробную терапию. Это важно в некоторых условиях, но тест с окрашиванием по Граму имеет 3 недостатка, которые ограничивают его полезность в большинстве клинических условий.Во-первых, это нечувствительный тест, который является достоверно положительным только в том случае, если концентрация бактерий в моче ≥10 5 КОЕ / мл; инфекции с бактериальной концентрацией 10 2 –10 3 КОЕ / мл могут не быть обнаружены с помощью этого теста. Во-вторых, этот тест является слишком трудоемким для большинства лабораторий клинической микробиологии, чтобы предлагать его на более чем выборочной основе. Наконец, поскольку он может не обнаруживать бактерии при концентрациях 10 2 –10 3 КОЕ / мл, его не следует использовать в амбулаторных условиях для пациентов с неосложненными ИМП.Из-за этих ограничений его использование должно быть ограничено пациентами со случаями острого пиелонефрита, пациентами с инвазивными ИМП или другими пациентами, для которых важно иметь немедленную информацию о природе инфекционного патогена.
Обнаружение бактериурии нитритным тестом . Бактериурию можно обнаружить химически, когда бактерии производят нитрит из нитрата. Биохимическая реакция, обнаруживаемая с помощью нитритного теста, связана с членами семейства Enterobacteriaceae (патогены, наиболее часто вызывающие ИМП), но полезность теста ограничена, поскольку выработка нитритов не связана с патогенами мочевыводящих путей, такими как как S.saprophyticus, виды Pseudomonas или энтерококки [43]. Еще одним ограничением теста является то, что он требует тестирования образца первой мочи, произведенной утром, поскольку требуется ≥4 часов, чтобы бактерии превратили нитрат в нитрит на уровне, который можно надежно обнаружить.
Обнаружение пиурии с помощью микроскопии мочи . Пиурию можно обнаружить и количественно определить микроскопически путем измерения скорости выделения лейкоцитов с мочой, подсчета лейкоцитов с помощью гемоцитометра, подсчета лейкоцитов в образцах мочи с помощью окрашивания по Граму или подсчета лейкоцитов в центрифугированном образце.Преимущества микроскопии мочи заключаются в том, что лейкоциты, лейкоцитарные цилиндры и другие клеточные элементы наблюдаются напрямую. Одним из недостатков микроскопии мочи является то, что лейкоциты быстро разрушаются в несвежей или недостаточно сохраненной моче. Кроме того, каждый из этих методов имеет недостатки, ограничивающие его полезность в качестве стандартного теста [28]. Из-за этих недостатков микроскопию мочи следует проводить только у пациентов с подозрением на пиелонефрит или другие более серьезные инфекции.
Самый точный микроскопический метод количественной оценки пиурии – это измерение скорости экскреции лейкоцитов с мочой [43]. У пациентов с симптоматическими ИМП уровень экскреции лейкоцитов с мочой составляет ≥400 000 лейкоцитов / час [43]. Однако этот тест нецелесообразен для клинического использования, поэтому лабораториям необходимо использовать другие методы. Простая и недорогая альтернатива – подсчет лейкоцитов мочи с помощью гемоцитометра. Сравнение показателей гемоцитометра со скоростью экскреции лейкоцитов с мочой показало, что количество гемоцитомеров ≥10 лейкоцитов / мм 3 коррелирует со скоростью экскреции лейкоцитов с мочой ≥400000 лейкоцитов / час [43].Более того, корреляция количества гемоцитометра с количеством колоний в моче показала, что у пациентов с симптоматическими ИМП и бактериальной концентрацией> 10 5 КОЕ / мл количество лейкоцитов в моче ≥10 лейкоцитов / мм 3 [43]. Корреляция количества клеток гемоцитометра для пациентов с бактериальными концентрациями <10 5 КОЕ / мл была изучена Stamm et al. [15], которые обнаружили, что количество лейкоцитов в моче ≥8 клеток / мм 3 коррелировало с бактериальными концентрациями <10 5 КОЕ / мл в образцах, полученных при надлобковой аспирации или прямой катетеризации у женщин с острым дизурическим синдромом.Хотя использовать гемоцитометр для подсчета лейкоцитов проще, чем измерять скорость экскреции лейкоцитов с мочой, для клинических лабораторий нецелесообразно использовать гемоцитометр для подсчета лейкоцитов на регулярной основе. Наиболее практичный микроскопический метод включает подсчет количества лейкоцитов в осадке центрифугированных образцов мочи. Согласно обзору Паппаса [43], этот метод неточен из-за неадекватной стандартизации метода. По этим причинам, а также для облегчения обработки большого количества образцов большинство лабораторий используют экспресс-тесты на лейкоцитарную эстеразу в качестве заменителя микроскопического подсчета лейкоцитов.
Обнаружение пиурии с помощью лейкоцитарной эстеразы . Тесты на лейкоцитарную эстеразу основаны на гидролизе сложноэфирных субстратов белками с эстеролитической активностью [44]. Нейтрофилы человека продуцируют до 10 белков с эстеролитической активностью. Эти белки реагируют с сложноэфирными субстратами с образованием спиртов и кислот, которые затем вступают в реакцию с другими химическими веществами, вызывая изменение цвета, пропорциональное количеству эстеразы в образце [44]. Эти тесты имеют преимущество в обнаружении как эстераз в интактных лейкоцитах, так и эстераз, высвобождаемых после лизиса клеток; поэтому даже образцы, которые не хранились должным образом, могут дать положительный результат теста.Тесты на лейкоцитарную эстеразу могут давать ложноположительные результаты, если моча загрязнена бактериями, присутствующими во влагалищной жидкости; когда образец содержит эозинофилы или трихомонады или видов, оба из которых могут действовать как источники эстераз; и когда окислители или формалин вступают в реакцию с тест-полосками с получением ложноположительных результатов теста [44, 45]. Тесты на лейкоцитарную эстеразу могут показать снижение положительных результатов теста, если образец имеет повышенный удельный вес и / или повышенные уровни белка и глюкозы; когда присутствуют консерванты борной кислоты; когда присутствует большое количество аскорбиновой или щавелевой кислоты; и когда пациент получал противомикробные препараты, такие как цефалотин, цефалексин или тетрациклин [44, 45].Высокие концентрации тетрациклина могут привести к ложноотрицательным результатам теста [45]. Как показано в таблице 3, когда он используется отдельно, тест на лейкоцитарную эстеразу имеет относительно низкую чувствительность и специфичность и низкую положительную прогностическую ценность, как тест на ИМП, с более высокой отрицательной прогностической ценностью [28, 35, 38, 46–54] .
Таблица 3
Рабочие характеристики тестов на лейкоцитарную эстеразу и нитрит, по отдельности или в комбинации, для выявления бактериурии и / или пиурии.
Таблица 3
Рабочие характеристики тестов на лейкоцитарную эстеразу и нитрит, по отдельности или в комбинации, для выявления бактериурии и / или пиурии.
Одновременное выявление бактериурии и пиурии . Коммерческие продукты для анализа мочи включают тесты как на нитрит, так и на лейкоцитарную эстеразу, что позволяет проводить тесты как на бактериурию, так и на пиурию. Как показано в таблице 3, ряд клинических оценок определил рабочие характеристики этих тестов.Оценки нельзя сравнивать напрямую, потому что исследования проводились в течение 20-летнего периода в различных лабораториях и медицинских учреждениях, было множество дизайнов исследований и в исследованиях использовались различные коммерческие продукты. Тем не менее, результаты достаточно последовательны, чтобы можно было сделать некоторые выводы. Во-первых, два теста, когда они используются вместе, работают лучше, чем любой тест, когда они используются по отдельности. Во-вторых, тесты обладают лучшими характеристиками для выявления бактериурии при большом количестве колоний, чем при низком [51].В-третьих, эти тесты имеют низкую чувствительность, высокую специфичность, низкую положительную прогностическую ценность и высокую отрицательную прогностическую ценность. Взятые вместе, рабочие характеристики этих тестов делают их полезными в качестве способа исключения бактериурии на основе отрицательного результата теста.
Ряд препаратов может изменять цвет мочи; Аномальный цвет мочи может повлиять на анализы мочи, основанные на интерпретации изменений цвета. В некоторых случаях это может маскировать изменения цвета, а в других может привести к ложноположительной интерпретации [45].
Посевы и лабораторная диагностика ИМП
Обычный посев мочи на бактерии . Посев мочи может не потребоваться при обследовании амбулаторных пациентов с неосложненными ИМП [55, 56]. Однако посев мочи необходим амбулаторным пациентам, у которых рецидивирующие ИМП, неэффективное лечение или осложненные ИМП. Посев мочи также необходим стационарным пациентам, у которых развиваются ИМП. Бактериальный посев остается важным тестом в диагностике ИМП не только потому, что он помогает документировать инфекцию, но также потому, что он необходим для определения личности инфекционного микроорганизма (ов) и для тестирования чувствительности к противомикробным препаратам.Это особенно верно из-за увеличения случаев устойчивости к противомикробным препаратам.
Наиболее часто используемым критерием для определения значительной бактериурии является наличие ≥10 5 КОЕ на миллилитр мочи [15, 57, 58]. Этот критерий был установлен только для женщин с острым пиелонефритом или женщин, у которых не было симптомов, но было несколько культур мочи, которые дали такое количество бактерий; однако этот критерий часто применяется к другим группам пациентов [15].Однако большинство пациентов с ИМП не попадают ни в одну из категорий, и у 30–50% пациентов с острым уретральным синдромом количество колоний будет <10 5 КОЕ / мл [15]. По этой причине многие лаборатории предпочли использовать более низкое количество колоний в качестве критерия для интерпретации и представления результатов. Одним из общих критериев является количество колоний 10 4 КОЕ / мл, что, как ожидается, увеличит чувствительность теста, не делая его непрактичным для клиницистов и лабораторий.
Катетеризованные пациенты (у которых могут быть низкие концентрации бактерий, которые могут прогрессировать до более высоких концентраций) и многие пациенты с инфекциями нижних мочевыводящих путей имеют количество колоний намного ниже 10 5 КОЕ / мл, если образцы взяты через надлобковый аспират или катетеризация [59]. Соответственно, наиболее подходящим диагностическим критерием для образцов культур мочи, полученных с помощью надлобкового аспирата или катетеризации, является концентрация бактерий ≥10 2 КОЕ / мл [15, 59].
Регулярные последующие посевы культур для испытания на излечение не рекомендуются пациентам, которые лечились от бессимптомной бактериурии, острого неосложненного цистита или острого неосложненного пиелонефрита [60], и для которых есть доказательства надлежащего клинического ответа на терапию. [2]. Тем не менее, последующие посевы рекомендуются пациентам с инфекциями, которые не реагируют на терапию, пациентам с рецидивирующими ИМП, пациентам с анатомическими или функциональными аномалиями мочевыводящих путей или пациентам, у которых по-прежнему остаются необъяснимые аномальные результаты анализа мочи.
Анаэробные бактериальные посевы мочи . Нормальная флора толстого кишечника, влагалища и кожи содержит большое количество анаэробных бактерий. Однако, поскольку анаэробные бактерии вызывают ИМП только в редких случаях, выделение анаэробных бактерий из мочи путем посева не имеет клинического значения для большинства пациентов с ИМП. Посев мочи на анаэробные бактерии следует ограничивать пациентами с анатомическими аномалиями (например, энтеровезикулярными свищами), которые увеличивают вероятность заражения анаэробными бактериями.
Посев мочи на грибы . Как указывалось ранее, микробиологическое обнаружение почти всех случаев фунгурии может быть достигнуто с использованием обычных бактериальных сред. Имеются ограниченные данные об использовании тестов, отличных от культуральных, для обнаружения фунгурии. Хуанг и др. [61] сообщили, что пиурия не коррелировала с фунгурией, независимо от того, была ли у пациентов сопутствующая бактериурия или постоянный мочевой катетер. Кауфман и др. [16] сообщили, что из 648 пациентов с фунгурией, у которых был проведен анализ мочи, 354 (54.6%) имели пиурию и 230 (35,5%) гематурию. Из 648 пациентов только у 410 были отчеты об образцах мочи, которые включали комментарий относительно наличия или отсутствия дрожжевых грибков; У 247 (60,2%) из этих 410 пациентов образцы мочи были положительными на дрожжи [16]. На основании этих наблюдений и поскольку нитритный тест бесполезен при обнаружении фунгурии, использование анализа мочи для обнаружения фунгурии в настоящее время представляется ограниченным. Этот вывод может измениться по мере публикации дополнительной информации о клинических исходах пациентов с фунгурией, результатах лабораторных исследований образцов мочи и эффектах химиотерапии.
Посев мочи на микобактерии . Хотя внелегочный туберкулез встречается редко в США, он может поражать мочеполовые пути. Традиционная лабораторная диагностика микобактериальных ИМП проводится с помощью кислотоустойчивых мазков и микобактериальных культур [62], но более свежие данные показывают, что диагноз также можно поставить с помощью тестов амплификации нуклеиновых кислот [63, 64]. Однако есть лишь ограниченные данные об использовании таких тестов для диагностики туберкулеза мочеполовых органов, и ни один из этих тестов не был одобрен или одобрен Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США для этого показания.До тех пор, пока не будут получены более точные данные, авторы рекомендуют не использовать рутинные тесты амплификации нуклеиновых кислот, особенно у пациентов с низким клиническим подозрением на туберкулез мочеполовой системы.
Поскольку нетуберкулезные микобактерии, такие как Mycobac terium smegmatis , могут присутствовать в качестве колонизирующей флоры (и для уменьшения количества контаминирующих бактерий), перед получением образцов следует промыть наружные гениталии [64]. Лучший образец для посева мочи на микобактерии – это первое мочеиспускание.Может потребоваться несколько образцов, поскольку результаты посева микобактерий положительны у 25–95% пациентов, а мазки – у 50–70% пациентов с туберкулезными инфекциями мочеполовых путей [62].
Интерпретация результатов посева мочи . Микробиологам необходимо интерпретировать микробиологическое значение роста на чашках с культурой, чтобы определить, необходимы ли дальнейшая идентификация и тестирование чувствительности к противомикробным препаратам. Большинство результатов культивирования можно легко интерпретировать; отсутствие роста и сильное загрязнение являются однозначными результатами, как и чистые культуры обычных патогенов, растущие в количестве> 10 5 КОЕ на миллилитр мочи.Интерпретация культур, которые дают чистый рост в меньших количествах, также ясна для образцов, полученных с помощью надлобковой аспирации или прямой катетеризации. С другой стороны, интерпретация посевов мочи, которые дают смешанную флору в различных количествах, может быть затруднена. Хотя был разработан ряд алгоритмов для интерпретации посевов мочи, большое количество потенциальных комбинаций микроорганизмов – в различных количествах – и необходимость соотносить эти результаты с различными типами ИМП ограничивают полезность любого алгоритма.Один алгоритм представлен в таблице 4.
Таблица 4
Интерпретация результатов посева образцов мочи, обнаруживающих распространенные патогены мочевыводящих путей.
Таблица 4
Интерпретация результатов посева образцов мочи, дающих общие патогены мочевыводящих путей.
Независимо от алгоритма, используемого для интерпретации, лаборатории должны сообщать результаты посева с инструкциями по интерпретации, чтобы помочь лечащему врачу оценить клиническую значимость результатов.Культуры, которые дают однозначные результаты культивирования, должны интерпретироваться и сообщаться как таковые. Отчеты об испытаниях культур, которые дают смешанную флору в различных количествах, должны указывать выделенные микроорганизмы, количество каждого микроорганизма и вероятную клиническую важность каждого изолята.
Тестирование чувствительности к противомикробным препаратам . В каждой лаборатории должны быть инструкции по тестированию патогенов на чувствительность к противомикробным препаратам. Эти руководящие принципы должны быть разработаны, и тесты на чувствительность к противомикробным препаратам должны быть выполнены и представлены в соответствии с самой последней версией руководящих принципов NCCLS.Бактериальные или грибковые изоляты неопределенного клинического значения не должны тестироваться на чувствительность к противомикробным препаратам в целях повседневного ухода за пациентами.
Заключение
У большинства пациентов с неосложненным острым циститом есть случаи, которые клинически просты, и им может не потребоваться никаких лабораторных исследований, кроме анализа мочи. Однако для значительного числа пациентов одного клинического анамнеза и физических данных может быть недостаточно для постановки окончательного диагноза ИМП.Этим пациентам и пациентам с осложненными ИМП необходимы лабораторные тесты для постановки диагноза и предоставления конкретной информации, касающейся личности патогенов и их чувствительности к антимикробным препаратам. И лабораторный диагноз, и клинический диагноз по результатам лабораторных анализов должны быть сделаны в свете используемого метода сбора данных; Врачи должны указать метод сбора в бланках заявки на тестирование. Из доступных лабораторных тестов анализ мочи полезен в первую очередь как средство исключения бактериурии, но он не является заменителем посева.Хотя посевы идентифицируют патогены, точная интерпретация результатов посева требует клинической информации, которая обычно доступна только клиницисту. Мы надеемся, что врачи-инфекционисты, в частности, поймут как сильные стороны, так и ограничения лабораторных диагностических исследований ИМП, которые были рассмотрены в этой статье, и мы надеемся, что они включат это понимание в текущие рекомендации по лечению [65 ] для оптимизации ухода за пациентами.
Список литературы
1.Амбулаторные посещения врачебных кабинетов, амбулаторных отделений больниц и отделений неотложной помощи: США, 1997 г.
,Vital Health Stat 13
,1999
, vol.143
(стр.i
–i
) 2.Научные и клинические проблемы в лечении инфекций мочевыводящих путей
,Am J Med
,2002
, vol.113
(стр.1
–4
) 3“ и др.Клиническое значение положительных посевов крови в 1990-е годы: проспективная комплексная оценка микробиологии, эпидемиологии и исходов бактериемии и фунгемии у взрослых
,Clin Infect Dis
,1997
, vol.24
(стр.584
–602
) 4.Эпидемиология инфекций мочевыводящих путей: заболеваемость, заболеваемость и экономические затраты
,Am J Med
,2002
, vol.113
(стр.5
–13
) 5,,.Инфекции мочевыводящих путей в Норвегии: бактериальная этиология и восприимчивость. Ретроспективное исследование клинических изолятов
,Clin Microbiol Infect
,2001
, vol.7
(стр.543
–7
) 6,,,,,.Изменяющиеся тенденции в частоте и устойчивости к противомикробным препаратам патогенов мочи в амбулаторных клиниках и больницах на юге Израиля, 1991–1995 гг.
,Eur J Clin Microbiol Infect Dis
,1997
, vol.16
(стр.834
–8
) 7,,,.Устойчивость к противомикробным препаратам уропатогенов, вызывающих внебольничные инфекции мочевыводящих путей у женщин: общенациональный анализ
,Clin Infect Dis
,2001
, vol.33
(стр.89
–94
) 8,,,,.Европейский взгляд на внутрибольничные инфекции мочевыводящих путей I. Отчет о микробиологической нагрузке, этиологии и чувствительности к противомикробным препаратам (исследование ESGNI-003)
,Clin Microbiol Infect
,2001
, vol.7
(стр.523
–31
) 9,,,,.Европейский взгляд на внутрибольничные инфекции мочевыводящих путей II. Отчет о заболеваемости, клинических характеристиках и исходах (исследование ESGNI-004)
,Clin Microbiol Infect
,2001
, vol.7
(стр.523
–31
) 10,,,,,.Меняющиеся паттерны бактериальных внутрибольничных инфекций: девятилетнее обследование в больнице общего профиля
,Химиотерапия
,1997
, vol.43
(стр.69
–76
) 11,,,.Характеристики патогенов, вызывающих инфекции мочевыводящих путей в больницах Северной Америки: результаты программы антимикробного надзора SENTRY, 1997 г.
,Diagn Microbiol Infect Dis
,1999
, vol.35
(стр.55
–63
) 12,,.Эпидемиология и частота резистентности среди патогенов, вызывающих инфекции мочевыводящих путей у 1510 госпитализированных пациентов: отчет программы SENTRY Antimicrobial Surveillance Programme (Северная Америка)
,Diagn Microbiol Infect Dis
,2001
, vol.40
(стр.129
–36
) 13,,,.Светские тенденции в частоте и этиологии внутрибольничных инфекций мочевыводящих путей в университетской больнице
,J Urol
,1993
, vol.150
(стр.414
–6
) 14Отчет Национальной системы надзора за внутрибольничными инфекциями (NNIS), сводка данных за январь 1990 г.
.май 1999, выдан июнь 1999
,Am J Infect Control
,1999
, vol.27
(стр.530
–2
) 15“ и др.Диагностика колиформной инфекции у женщин с острым дизурией
,N Engl J Med
,1982
, vol.307
(стр.463
–8
) 16“ и др.Проспективное многоцентровое наблюдение за грибком у госпитализированных пациентов
,Clin Infect Dis
,2000
, vol.30
(стр.14
–8
) 17,,. ,Cumitech 2B: лабораторная диагностика инфекций мочевыводящих путей
,1998
Вашингтон, округ Колумбия
Американское общество микробиологии
18,,.Очищение промежности перед мочой в середине потока, необходимый ритуал?
,Ланцет
,1979
, т.2
(стр.158
–9
) 19,,.Уменьшает ли чистый образец мочи бактериальное заражение?
,N Engl J Med
,1993
, vol.328
(стр.289
–90
) 20,,.Уровни бактериального заражения в неочищенных и чистых сборах мочи в середине потока у мальчиков
,J Pediatr
,1986
, vol.109
(стр.659
–60
) 21,,.Уровни бактериального заражения в собранной мочи у девочек
,J Pediatr
,1989
, vol.114
(стр.91
–3
) 22,.Амбулаторный посев мочи: имеет ли значение метод сбора?
,Arch Intern Med
,2000
, т.160
(стр.2537
–40
) 23,,,,.Оценка техники сбора мочи на микробные культуры
,Am J Infect Control
,1996
, vol.24
(стр.219
–21
) 24,,,.Задержка транспортировки и микробиологическое качество клинических образцов
,Am J Clin Pathol
,1975
, vol.64
(стр.689
–93
) 25,,.Влияние задержки на посев мочи
,J Clin Microbiol
,1976
, vol.4
(стр.102
–3
) 26,.Размножение контаминантных бактерий в моче и интерпретация отложенного посева
,J Clin Pathol
,1977
, vol.30
(стр.615
–9
) 27,.Доказательства практичности и рентабельности планшета для селекции грамположительных кокков для обычных посевов мочи
,J Clin Microbiol
,1981
, vol.14
(стр.617
–9
) 28,,,,,.Лабораторная оценка инфекций мочевыводящих путей в амбулаторной клинике
,Am J Clin Pathol
,1994
, vol.101
(стр.100
–3
) 29,,.Сравнение однодневной и двухдневной инкубации культур мочи
,Diagn Microbiol Infect Dis
,1995
, vol.21
(стр.55
–6
) 30,,.Оценка микробиологической обработки образцов мочи: сравнение ночной и двухдневной инкубации
,J Clin Microbiol
,1992
, vol.30
(стр.1600
–1
) 31,,,,,.Производительность четырех хромогенных культуральных сред мочи после одного или двух дней инкубации по сравнению с эталонными средами
,J Clin Microbiol
,2002
, vol.40
(стр.1500
–3
) 32,,.,,,,.Mycobacterium
,Руководство по клинической микробиологии
,1999
7-е изд.Вашингтон, округ Колумбия
Американское общество микробиологии Press
(стр.399
–437
) 33,.Автоматизированное прямое определение чувствительности к антимикробным препаратам при микроскопическом скрининге культур мочи
,J Clin Microbiol
,1980
, vol.11
(стр.157
–61
) 34,,,.Обнаружение значительной бактериурии при микроскопическом исследовании мочи
,Lab Med
,1981
, vol.12
(стр.294
–6
) 35,,.Оценка активности эстеразы лейкоцитов как метод быстрого скрининга бактериурима
,J Clin Microbiol
,1982
, vol.15
(стр.852
–4
) 36,,.De La Maza Luis. Скрининг посевов мочи тремя автоматизированными системами
,J Clin Microbiol
,1982
, vol.15
(стр.468
–74
) 37,,, et al.Применение окрашивания по Граму на предметных стеклах по сравнению с количественным посевом для диагностики инфекции мочевыводящих путей
,Am J Clin Pathol
,1993
, vol.99
(стр.132
–6
) 38,,,.Лабораторное определение лейкоцитарной эстеразы и нитрита в качестве альтернативы микроскопии мочи [письмо]
,Eur J Clin Microbiol Infect Dis
,1996
, vol.15
(стр.663
–4
) 39,,.Оценка цитоцентрифужного окрашивания по Граму в качестве скринингового теста на бактериурию в образцах из конкретных популяций пациентов
,Am J Clin Pathol
,1997
, vol.108
(стр.515
–24
) 40,,,.Упрощенный метод выявления значительной бактериурии при микроскопическом исследовании мочи
,J Clin Microbiol
,1998
, vol.36
(стр.820
–3
) 41,,,.Оценка центрифугированного и окрашенного по Граму мазка, анализа мочи и теста с полосками с реагентами для выявления бессимптомной бактериурии у акушерских пациентов
,Am J Obstet Gynecol
,2000
, vol.182
(стр.1076
–9
) 42,,.Клиническая оценка трех скрининговых тестов мочи
,J Clin Microbiol
,1987
, vol.25
(стр.467
–70
) 43.Лаборатория диагностики и лечения инфекций мочевыводящих путей
,Med Clin N Amer
,1991
, vol.75
(стр.313
–25
) 44,,. , , , и другие.Базовое исследование мочи
,Клиническая диагностика и ведение лабораторными методами
,2001
20-е изд.Philadelphia
WB Saunders
(стр.367
–402
) 45Multistix 10 SG, Multistix 9, Multistix 9 SG, Multistix 8 SG, Multistix 7, N-Multistix GS, N-Multistix, N-Multistix, Multistix, полоски с реагентами Bili-Labstix [вставка в упаковку]
,1992
Elkhart, IN
Bayer
46,.Использование активности лейкоцитарной эстеразы-нитрата в качестве прогностического анализа значительной бактериурии
,J Clin Microbiol
,1983
, vol.18
(стр.1256
–7
) 47,.Оценка лейкоцитарного теста, используемого для скрининга культур мочи
,J Clin Microbiol
,1984
, vol.20
(стр.820
–1
) 48,.Тест на активность лейкоцитарной эстеразы и нитриты как быстрый скрининг на значительную бактериурию
,Am J Clin Pathol
,1985
, vol.83
(стр.84
–7
) 49,.Лабораторная оценка тестов на лейкоцитарную эстеразу и нитрит для выявления бактериурии
,J Clin Microbiol
,1985
, vol.21
(стр.840
–2
) 50,.Использование быстрых скрининговых тестов при обработке образцов мочи традиционным посевом и AutoMicrobic System
,J Clin Microbiol
,1985
, vol.21
(стр.783
–7
) 51,,,.Обнаружение бактериурии и пиурии в течение двух минут
,J Clin Microbiol
,1985
, vol.21
(стр.578
–81
) 52,,,.Ограниченная полезность тест-полосок для определения мочи для выявления катетер-ассоциированной бактериурии у пациентов интенсивной терапии
,Anaesth Intensive Care
,1995
, vol.23
(стр.706
–7
) 53,.Оценка скрининговых тестов на лейкоцитарную эстеразу и нитриты для выявления бактериурии у женщин с подозрением на неосложненные инфекции мочевыводящих путей
,J Clin Microbiol
,1999
, vol.37
(стр.3051
–2
) 54,,.Низкая прогностическая способность анализа мочи и микроскопического исследования для выявления инфекции мочевыводящих путей
,Am J Clin Pathol
,2000
, vol.113
(стр.709
–13
) 55,.Лечение инфекций мочевыводящих путей у взрослых
,N Engl J Med
,1993
, vol.329
(стр.1328
–34
) 56,,,.Ограниченное клиническое применение посевов крови и мочи при лечении острого пиелонефрита во время беременности
,Am J Obstet Gynecol
,2000
, vol.182
(стр.1437
–41
) 57.Бессимптомные инфекции мочевыводящих путей
,Trans Assoc Am Phys
,1956
, vol.69
(стр.56
–63
) 58.Бактериурия и диагностика инфекций мочевыводящих путей
,Arch Intern Med
,1957
, vol.100
(стр.709
–14
) 59,.Бактериурия у катетеризованного пациента: какой количественный уровень бактериурии актуален?
,N Engl J Med
,1984
, vol.311
(стр.560
–4
) 60,,,,.Посев мочи после лечения неосложненного цистита у женщин
,South Med J
,1989
, vol.74
(стр.165
–9
) 61,,.Пиурия и фунгурия [письмо]
,Ланцет
,1995
, vol.346
(стр.582
–3
) 62,. ,Микобактериология общественного здравоохранения: руководство для лаборатории уровня III
,1985
Атланта
Центры по контролю и профилактике заболеваний
стр.25
63“ и др.Быстрая идентификация комплекса Mycobacterium tuberculosis в образцах мочи с помощью теста амплификации Gen-Probe
,Urol Res
,1997
, vol.25
(стр.391
–4
) 64,,,,,.Полимеразная цепная реакция при клиническом подозрении на туберкулез мочеполовой системы: сравнение с внутривенной урографией, биопсией мочевого пузыря и посевом кислотоустойчивых бацилл в моче
,Урология
,2000
, vol.56
(стр.570
–4
) 65,,,,,.Руководство по противомикробной терапии неосложненного острого бактериального цистита и острого пиелонефрита у женщин
,Clin Infect Dis
,1999
, vol.29
(стр.745
–58
)© 2004 Американским обществом инфекционных болезней
тестов на бактериальный вагиноз | Michigan Medicine
Обзор теста
Для тестов на бактериальный вагиноз берут образцы жидкости из влагалища.Образцы исследуют под микроскопом, чтобы увидеть, есть ли на них признаки инфекции.
Бактериальный вагиноз вызывается изменением баланса бактерий во влагалище. Обычно во влагалище много «хороших» и несколько «плохих» бактерий. Хорошие типы помогают контролировать рост плохих. Но когда у вас бактериальный вагиноз, не хватает хороших бактерий и слишком много плохих.
Многие женщины с бактериальным вагинозом не имеют симптомов. Самый частый симптом – увеличение выделений из влагалища.Выделения часто имеют рыбный запах.
Женщины, у которых бактериальный вагиноз с симптомами во время беременности, нуждаются в лечении. Некоторых беременных женщин, у которых нет симптомов, также следует лечить.
Тесты
Тесты на бактериальный вагиноз включают:
- Мокрое крепление. Образец выделений из влагалища проверяется на наличие бактерий, лейкоцитов и необычных клеток, называемых клетками-подсказками. Если ключевые клетки обнаружены, это означает, что у вас может быть бактериальный вагиноз.
- Тест Уиффа. Образец выделений проверяется на предмет появления сильного рыбного запаха при добавлении специального раствора. Рыбный запах обычно означает, что у вас бактериальный вагиноз.
- Вагинальный pH. Измеряется pH образца выделений из влагалища. Бактериальный вагиноз часто вызывает pH выше нормы.
- Молекулярный тест. Образец выделений из влагалища проверяется на генетический материал или ДНК этих бактерий.
Зачем это нужно
Тесты на бактериальный вагиноз проводятся, чтобы помочь найти причину таких симптомов, как аномальные выделения из влагалища, раздражение или боль.
Как подготовиться
Ваш врач может попросить вас не спринцеваться, не заниматься сексом и не использовать вагинальные лекарства в течение 24 часов до этого теста.
Как это делается
Вы снимете одежду ниже пояса. У вас будет платье, которое будет драпироваться вокруг талии. Затем вы лягте на спину на экзаменационный стол.Ваши ноги будут подняты и поддержаны стременами. Это похоже на гинекологический осмотр или мазок Папаниколау.
Ваш врач вставит вам смазанный инструмент, называемый расширителем, во влагалище. Зеркало мягко раздвигает стенки влагалища. Это позволяет вашему врачу увидеть внутреннюю часть влагалища и шейку матки.
Затем с помощью тампона берут образцы жидкости из влагалища.
Каково это ощущение
Вы можете почувствовать некоторый дискомфорт при установке расширителя, особенно если ваше влагалище раздражено и болезненно.
Риски
Вероятность возникновения проблемы при тесте на бактериальный вагиноз мала.
Результаты
Обычный | Нет аномальных выделений из влагалища. |
|---|---|
Влажный образец не показывает клетки-подсказки или большое количество бактерий, вызывающих бактериальный вагиноз. | |
Добавление специального раствора к пробе выделений не вызывает запаха рыбы. | |
Уровень pH влагалища в пределах нормы. | |
Ненормальный | Во влагалище жидкие серовато-белые выделения. |
Влажное изображение показывает клетки-подсказки или большое количество типов бактерий, вызывающих бактериальный вагиноз, или и то, и другое. | |
Добавление специального раствора к образцу выделений вызывает рыбный запах. |